processo de obtenÇço de transformantes de linhagens de levedura contendo méltiplas càpias estÁveis da informaÇço genÉtica desejada inseridas no genoma

PROCESSO DE OBTENÇçO DE TRANSFORMANTES DE LINHAGENS DE LEVEDURA CONTENDO MéLTIPLAS CàPIAS ESTÁVEIS DA INFORMAÇçO GENÉTICA DESEJADA INSERIDAS NO GENOMA. O presente pedido consiste no desenvolvimento de um novo processo que permite a transformação genética de linhagens da levedura Saccharomyces spp de coleção de cultura de laboratório e de leveduras empregadas em processos industriais. Para tanto, foi construído um vetor de transformação genética que consiste em um fragmento de DNA de fita dupla contendo um cassete de expressão gênica de levedura ladeada por fragmentos correspondentes às regiões franqueadoras dos transposons Ty1 e Ty2. Estes fragmentos de DNA são longas regiões terminais ("Long terminal repeats" - LTR) que são denominados elementos delta () e estão presentes em mais de 200 cópias no genoma das células de leveduras. Para construir o novo sistema de transformação, foi importante utilizar, como exemplo, um gene repórter que permitiu confirmar o sucesso da transformação, através da comprovação da inserção da informação genética desejada no genoma da levedura. Para tanto, foi o escolhido o cDNA da glicoamilase de Aspergilius awamori, construindo-se o vetor pGlico.