estabelecimento de linhagem de cÉlulas-tronco embrionÁrias humanas usando cÉlulas de mamÍferos

ESTABELECIMENTO DE LINHAGEM DE CÉLULAS-TRONCO EMBRIONÁRIAS HUMANAS USANDO CÉLULAS DE MAMÍFEROS, onde são reveladas preparações purificadas de células-tronco embrionárias humanas com determinadas características específicas da população. Esta preparação é caracterizada por uma expressão positiva dos seguintes marcadores de superficie celular pluripotentes: SSEA-1 (-); SSEA-4 (+); TRA-1-60 (+); TRA-1-81 (+); fosfatase alcalina (+), bem como um conjunto de marcadores celulares ES incluindo Oct-4, Nanog, Rex1, Sox2, Thy1, FGF4, ABCG2, Dppa5, UTF1, Cripto1, hTERT, Conexina-43 e Conexina-45. As células da preparação são negativas para marcadores específicos da linhagem como Queratina 8, Sox- 1, NFH (ectoderme), MyoD, brachyury, actina cardíaca (mesoderme), HNF-3 beta, albumina e PDX1 (endoderme). As células da preparação são células-tronco embrionárias humanas, possuem cariótipos normais, exibem alta atividade da telomerase e continuam a proliferar em um estado indiferenciado após cultura contínua de mais de 40 passagens. A linhagem de células-tronco embrionárias Relicell® Hes 1 também possui a habilidade, ao longo da cultura, de diferenciar os tipos de tecidos e células derivados de todas as três camadas de origem embrionárias (endoderme, mesoderme e ectoderme). Também são revelados métodos para isolar a linhagem de células-tronco embrionárias humanas. Purified preparations of human embryonic stem cells with certain population-specific characteristics are disclosed. This preparation is characterized by the positive expression of the following pluripotent cell surface markers: SSEA-1 (−); SSEA-4 (+); TRA-1-60 (+); TRA-1-81 (+); alkaline phosphatase (+), as well as a set of ES cell markers including Oct-4, Nanog, Rex1, Sox2, Thy1, FGF4, ABCG2, Dppa5, UTF1, Cripto1, hTERT, Connexin-43 and Connexin-45. The cells of the preparation are negative for lineage specific markers like Keratin 8, Sox-1, NFH (ectoderm), MyoD, brachyury, cardiac-actin (mesoderm), HNF-3 beta, albumin, and PDX1 (endoderm). The cells of the preparation are human embryonic stem cells, have normal karyotypes, exhibit high telomerase activity and continue to proliferate in an undifferentiated state after continuous culture for over 40 passages. The embryonic stem cell line Relicell™ hES1 also retains the ability, throughout the culture, to differentiate into cell and tissue types derived from all three embryonic germ layers (endoderm, mesoderm and ectoderm). Methods for isolating a human embryonic