MÉTODO, COMPOSIÇÃO E KIT PARA ENRIQUECIMENTO SELETIVO DE TAMANHO DE ÁCIDOS NUCLEICOS

MÉTODO, COMPOSIÇÃO E KIT PARA ENRIQUECIMENTO SELETIVO DE TAMANHO DE ÁCIDOS NUCLEICOS. É fornecido um método para isolar e concentrar ácidos nucleicos de tamanhos alvo selecionados (por exemplo, em incrementos inferiores a 1000 pares de bases) a partir de uma mistura de fluido biológico que compreend...

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Hauptverfasser: HARSHA MADAN KITTUR, DANIEL ROBERT MARSHAK, YIN TO CHIU, MASAE KOBAYASHI
Format: Patent
Sprache:por
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Zusammenfassung:MÉTODO, COMPOSIÇÃO E KIT PARA ENRIQUECIMENTO SELETIVO DE TAMANHO DE ÁCIDOS NUCLEICOS. É fornecido um método para isolar e concentrar ácidos nucleicos de tamanhos alvo selecionados (por exemplo, em incrementos inferiores a 1000 pares de bases) a partir de uma mistura de fluido biológico que compreende combinar a mistura de fluido biológico e um primeiro sistema bifásico aquoso (ATPS) formado a partir de um componente de polímero ou tensoativo de formação de primeira fase dissolvido em uma solução de primeira fase e uma solução de segunda fase, de modo que fragmentos de ácido nucleico alvo abaixo de um tamanho alvo desejado sejam divididos para a dita solução de segunda fase e contaminantes se dividam para a solução de primeira fase, extrair e misturar a solução de segunda fase com um segundo ATPS formado a partir de um componente de polímero ou tensoativo de formação de segunda fase dissolvido em uma solução de terceira fase e uma solução de quarta fase, de modo que os fragmentos de ácido nucleico alvo se dividam e se concentrem na solução de terceira fase, e recuperar os fragmentos de ácido nucleico alvo concentrados da solução de terceira fase. São fornecidos, também, uma composição e kit para isolar e concentrar ácidos nucleicos de tamanhos alvo selecionados, conforme descrito acima. Provided is a method for isolating and concentrating nucleic acids of selected target sizes (e.g., in increments less than 1000 base pairs) from a biological fluid mixture comprising combining the biological fluid mixture and a first aqueous two-phase system (ATPS) formed from a first phase forming polymer or surfactant component dissolved in a first phase solution, and a second phase solution, such that target nucleic acid fragments below a desired target size partition to said second phase solution and contaminants partition to the first phase solution, extracting and mixing the second phase solution with a second ATPS formed from a second phase forming polymer or surfactant component dissolved in a third phase solution and a fourth phase solution, such that the target nucleic acid fragments partition to and concentrate in the third phase solution, and recovering the concentrated target nucleic acid fragments from the third phase solution. A composition and kit for isolating and concentrating nucleic acids of selected target sizes as described above are also provided.