proteínas recombinantes codificadas no núcleo direcionadas para o cloroplasto em microalgas

o pedido refere-se genericamente ao direcionamento para cloroplasto de proteínas de interesse codificadas no núcleo em microalgas. são providos aqui cassetes de expressão compreendendo uma sequência de nucleotídeos que codifica um peptídeo de direcionamento para cloroplasto ligadas operacionalmente a uma sequência de nucleotídeos que codifica uma proteína de interesse, onde o dito peptídeo de direcionamento para cloroplasto compreende a sequência de direcionamento bipartida da fosforibuloquinase de nannochloropsis gaditana (ngprk bts). a invenção provê ainda vetores compreendendo os cassetes de expressão, e microalgas apresentando um cassete de expressão incorporado de forma estável ou expresso de forma transiente em seus genomas nucleares como descrito acima. são também providos métodos para a produção de uma proteína de interesse no cloroplasto de uma microalga, bem como métodos para a modulação de rotas do cloroplasto. The application generally relates to chloroplast targeting of nuclear-encoded proteins of interest in microalgae. Provided herein are expression cassettes comprising a nucleotide sequence encoding a chloroplast targeting peptide operably linked to a nucleotide sequence encoding a protein of interest, wherein said chloroplast targeting peptide comprises the bipartite targeting sequence of the phosphoribulokinase of Nannochloropsis gaditana (NgPRK BTS). The invention further provides vectors comprising the expression cassettes, and microalgae having stably incorporated or transiently expressed into their nuclear genomes an expression cassette described above. Methods are also provided for the production of a protein of interest in the chloroplast of a microalga, as well as methods for modulating chloroplast pathways.