Método e kit para diagnóstico da linfadenite caseosa em caprinos, utilizando o antígeno rcp01850

método e kit para diagnóstico da linfadenite caseosa em caprinos, utilizando o antígeno rcp01850. o presente invento trata-se de um método e kit para diagnóstico sorológico baseando-se em elisa indireto para linfadenite caseosa em caprinos, que utiliza a proteína recombinante cp01850 de c. pseudotub...

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Hauptverfasser: ANTÔNIO ALVES MAIA NETO, ANA CARLA DIÓGENES SUASSUNA BEZERRA, LENISE MARIA PARENTE MOTA, MÔNICA ELLEN DA COSTA SOARES, BORSUK SIBELE, FRANCISCO SILVESTRE BRILHANTE BEZERRA, MARA THAIS DE OLIVEIRA SILVA, THIAGO VINICIUS SANTOS E ALVES, GABRIEL FREITAS DE MACEDO, MARIA DA CONCEIÇÃO RODRIGUES FERNANDES, FRANCISCO CHAGAS BARBALHO NETO
Format: Patent
Sprache:por
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Beschreibung
Zusammenfassung:método e kit para diagnóstico da linfadenite caseosa em caprinos, utilizando o antígeno rcp01850. o presente invento trata-se de um método e kit para diagnóstico sorológico baseando-se em elisa indireto para linfadenite caseosa em caprinos, que utiliza a proteína recombinante cp01850 de c. pseudotuberculosis como antígeno para detectar a presença de anticorpos anti-c. pseudotuberculosis no soro dos animais. este diagnóstico consiste na aplicação das seguintes etapas: sensibilização de placa de 96 poços com o antígeno rcp01850 na concentração de 2microgramas/ml, seguido de bloqueio utilizando pbst mais leite em pó desnatado a 5%, aplicação dos soros dos animais diluído em pbs-t de 1:50, incubação do anticorpo anti-cabra marcado com peroxidase na diluição de 1:5000 em pbs-t, revelação com a solução substrato/cromógeno (tampão citrato-fosfato 0,05m, contendo 0.04% de ortofenilenodiamina e 30% de peróxido de hidrogênio, com ph 5,0), reação por meio de reação de parada com 25microlitros/poço de ácido sulfúrico a 5% e leitura em espectrofotômetro a 492nm. este diagnóstico apresentou acurácia, sensibilidade e especificidade de 99,7, 94,3 e 100%, respectivamente, quando foi utilizado um ponto de corte de 0,10425 para a detecção da lc em caprinos. deste modo, solicita-se a proteção deste método e kit para diagnóstico in vitro usando a proteína rcp01850 como antígeno com o objetivo de detectar a linfadenite caseosa em caprinos.