Método e kit para diagnóstico da linfadenite caseosa em caprinos, utilizando o antígeno rcp01850
método e kit para diagnóstico da linfadenite caseosa em caprinos, utilizando o antígeno rcp01850. o presente invento trata-se de um método e kit para diagnóstico sorológico baseando-se em elisa indireto para linfadenite caseosa em caprinos, que utiliza a proteína recombinante cp01850 de c. pseudotub...
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Format: | Patent |
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Zusammenfassung: | método e kit para diagnóstico da linfadenite caseosa em caprinos, utilizando o antígeno rcp01850. o presente invento trata-se de um método e kit para diagnóstico sorológico baseando-se em elisa indireto para linfadenite caseosa em caprinos, que utiliza a proteína recombinante cp01850 de c. pseudotuberculosis como antígeno para detectar a presença de anticorpos anti-c. pseudotuberculosis no soro dos animais. este diagnóstico consiste na aplicação das seguintes etapas: sensibilização de placa de 96 poços com o antígeno rcp01850 na concentração de 2microgramas/ml, seguido de bloqueio utilizando pbst mais leite em pó desnatado a 5%, aplicação dos soros dos animais diluído em pbs-t de 1:50, incubação do anticorpo anti-cabra marcado com peroxidase na diluição de 1:5000 em pbs-t, revelação com a solução substrato/cromógeno (tampão citrato-fosfato 0,05m, contendo 0.04% de ortofenilenodiamina e 30% de peróxido de hidrogênio, com ph 5,0), reação por meio de reação de parada com 25microlitros/poço de ácido sulfúrico a 5% e leitura em espectrofotômetro a 492nm. este diagnóstico apresentou acurácia, sensibilidade e especificidade de 99,7, 94,3 e 100%, respectivamente, quando foi utilizado um ponto de corte de 0,10425 para a detecção da lc em caprinos. deste modo, solicita-se a proteção deste método e kit para diagnóstico in vitro usando a proteína rcp01850 como antígeno com o objetivo de detectar a linfadenite caseosa em caprinos. |
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