Utilização das técnicas voltamétricas para o estudo do mecanismo de clivagem do dna

"UTILIZAçãO DAS TéCNICAS VOLTAMéTRICAS PARA O ESTUDO DO MECANISMO DE CLIVAGEM DO DNA". Concretizada na forma de um método voltamétrico para a elucidação do mecanismo da reação de clivagem de um oligodesoxiribonucleotídeo fita dupla de 19 mer catalisada pela metaloenzima de zinco nuclease mung bean. Um mecanismo do tipo S~ N~2 concertado com a participação dos três íons zinco do sítio ativo da nuclease mung bean (Zn1, Zn2 e Zn3) na reação de clivagem do oligo fita dupla foi proposto. Neste mecanismo, a hidrólise das ligações fosfodiésteres ocorre com inversão de configuração no átomo de fósforo, formando um estado de transição pentacoordenado, o qual é estabilizado por uma arginina. Um ácido aspártico, ligante do Zn2, ajuda a orientar o nucleófilo para a reação. O íon Zn2, além de fornecer o nucleófilo (função catalítica), ativa o oligo por meio de sua coordenação ao oxigênio livre do fosfato da ligação fosfodiéster que será hidrolisada. Os íons Zn1 e Zn3, além de estabilizarem a estrutura terciária da nuclease mung bean (funções estruturais), se ligam ao grupo abandonador durante a reação de clivagem, impedindo que o mesmo reaja com o estado de transição formado e promova a reação reversa.