EDICIÓN DE BASE DIVERSIFICADORA

Se refiere al campo del aumento de la diversidad genética de manera dirigida. En particular, a la provisión de métodos y medios para la diversificación de secuencias dirigidas, mediante el uso de editores de bases con un espectro de mutación ampliado, lo que incluye la provisión de sistemas de edici...

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Hauptverfasser: MEULEWAETER, FRANK, DHALLUIN, KATELIJN, DE VLEESSCHAUWER, DAVID
Format: Patent
Sprache:spa
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Beschreibung
Zusammenfassung:Se refiere al campo del aumento de la diversidad genética de manera dirigida. En particular, a la provisión de métodos y medios para la diversificación de secuencias dirigidas, mediante el uso de editores de bases con un espectro de mutación ampliado, lo que incluye la provisión de sistemas de edición de base diversificadora Cas12a, y usos de estos. Reivindicación 1: Un método para la edición de base diversificadora dirigida de al menos un segmento de ácido nucleico diana, caracterizado porque comprende (a) proporcionar al menos una célula o constructo que comprende al menos un segmento de ácido nucleico diana; (b) introducir en la célula diana, o poner en contacto con el constructo diana; (i) al menos un editor de base diversificador (DBE), o al menos una molécula de ácido nucleico que lo codifica; y (ii) al menos un ARN guía adecuado o al menos una molécula de ácido nucleico que lo codifica; (c) permitir la formación de complejos de (i) el al menos un editor de base diversificador y (ii) el al menos un ARN guía adecuado; (d) obtener al menos una célula o constructo que comprende al menos un segmento de ácido nucleico diana modificado; en donde la eficiencia de edición de base total de introducir al menos una sustitución de cualquier tipo en el al menos un segmento de ácido nucleico diana es al menos 0,2%, 0,5%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, o al menos 25%, en donde el límite superior es 100% o menos; y/o en donde la al menos una modificación del segmento de ácido nucleico diana se produce en una ventana de edición de base ampliada; y en donde el método no comprende el tratamiento del cuerpo humano o animal mediante cirugía o terapia y/o un método de diagnóstico practicado en el cuerpo humano o animal, y/o procesos para modificar la identidad genética de la línea germinal de los seres humanos. y en donde el editor de base diversificador comprende una porción CRISPR-Cas originada a partir de una endonucleasa CRISPR-Cas de Clase 2 Tipo V. Reivindicación 2: El método de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque el editor de base diversificador comprende una porción CRISPR-Cas que se originó a partir de una endonucleasa Cas12a. Reivindicación 3: El método de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, caracterizado porque la al menos una célula diana es una célula procariota, que incluye una célula bacteriana o una célula de arquea, o una célula eucariota, que incluye una célula de insecto, una célula de mamífero o una célula vegetal. Reivindicación 4: El métod