MÉTODOS DE SEPARACIÓN DE ESPECIES MOLECULARES DE OLIGONUCLEÓTIDOS RICOS EN GUANINA

En el presente documento se proporcionan métodos de separación de especies moleculares de un oligonucleótido rico en guanina de una mezcla de especies moleculares, en donde al menos una especie molecular de la mezcla, es un cuádruple formado a partir del oligonucleótido rico en guanina. En realizaciones ilustrativas, los métodos comprenden (a) aplicar la mezcla a una matriz cromatográfica que comprende un ligando hidrófobo, en donde dicho ligando hidrófobo comprende cadenas de alquilo C₄ a C₈, en donde las especies moleculares se unen al ligando hidrófobo y (b) aplicar, a la matriz cromatográfica, una fase móvil que comprende un gradiente de acetato y un gradiente de acetonitrilo, para eluir las especies moleculares del oligonucleótido rico en guanina. En aspectos ilustrativos, el oligonucleótido rico en guanina eluye en un primer conjunto de fracciones de elución y un cuádruple formado a partir del oligonucleótido rico en guanina, eluye en un segundo conjunto de fracciones de elución. Provided herein are methods of separating molecular species of a guanine-rich oligonucleotide from a mixture of molecular species, wherein at least one molecular species of the mixture is a quadruplex formed from the guanine-rich oligonucleotide. In exemplary embodiments, the methods comprise (a) applying the mixture to a chromatographic matrix comprising a hydrophobic ligand, wherein said hydrophobic ligand comprises C4 to C8 alkyl chains, wherein molecular species bind to the hydrophobic ligand and (b) applying a mobile phase which comprises a gradient of acetate and a gradient of acetonitrile but no cationic ion pairing agent to the chromatographic matrix to elute molecular species of the guanine-rich oligonucleotide. In exemplary aspects, the guanine¬ rich oligonucleotide elutes in a first set of elution fractions and a quadruplex formed from the guanine-rich oligonucleotide elutes in a second set of elution fractions.