Validación de una técnica por Cromatografía Líquida de Alta Resolución para la determinación cuantitativa de hemina en el QF-012

Hemina, protoporfirina IX Fe(III), se utiliza como modelo de la hemoglobina, mioglobina, citocromos y otras enzimas de las cuales es el grupo prostético. Los complejos de hemina son utilizados como ingredientes activos de medicamentos para el tratamiento de ataques de porfiria aguda y corregir la deficiencia de hierro en aquellos casos de trastorno en la absorción de este por vía oral. Durante la etapa de desarrollo del nuevo complejo de hemina QF-012, fue necesario disponer de una técnica analítica rápida, sencilla y adecuada para la determinación cualitativa y cuantitativa de la hemina. Se desarrolló y validó una técnica por Cromatografía Líquida de Alta Resolución para la determinación de la hemina en el QF-012. La técnica usó una columna LiChrosorb RP-18 y como fase móvil: acetonitrilo-ácido trifluoracético 0,3 % con 0,04 % de piridina [55 : 45 (v/v)]. La detección se realizó a 400 nm . La hemina y sus productos de degradación pueden ser separados con buena resolución. La curva de calibración en el intervalo de 10,0 a 60,0 μg/mL fue lineal, con un coeficiente de correlación igual a 0,994; la prueba estadística para el intercepto y la pendiente, no significativa. Los coeficientes de variación en los estudios de repetibilidad y precisión intermedia fueron inferiores al 2 % y se demostró estadísticamente que no existían diferencias significativas entre estos.