Detección de biotipos del Virus de la Diarrea Viral Bovina (VDVB) a través de RT-PCR

This paper describes the standardization of a reverse transcription (RT) polymerize chain reaction (PCR) in order to be used as a tool to detect the bovine viral diarrhea virus (BVDV). The primers employed amplified a sector of 280 bp that is in the 5’ UTR region of the viral genome. The VDVB NADL and Osloss strainswere used as positive controls for the standardization process.. In order to evaluate crossreaction a strain of border disease (BD) was utilized. The cDNA was obtained using the random primers method. The RT-PCR detected cytophatic as well as non-cytophatic byotipes of BVDV. The standardized protocol showed a good performance in vitro and it is the bases for evaluation and validation essays of this diagnostic test. En el presente artículo se describe la normalización de la prueba de RT-PCR para ser empleada como herramienta en la detección del Virus de la Diarrea Viral Bovina (VDVB). Los iniciadores utilizados amplificaron un sector de 280 pb que se encuentra dentro del extremo 5’ UTR del genoma viral. Para el proceso de normalización, se usó como control positivo, cepas de referencia de VDVB (NADL, Osloss). Para evaluar reacción cruzada se usó una cepa de virus de Enfermedad de las Fronteras (BD). La obtención del cDNA se realizó por el método de «random primers» (iniciadores aleatorios). La prueba detectó tanto cepas citopáticas, como no citopáticas del VDVB. El protocolo establecido demostró un buen funcionamiento in vitro y es la base para posteriores pruebas de validación y evaluación de la prueba diagnóstica.