Dopamine transporter interaction with blockers and transportable substrates: insights from kinetics study

Dopamiini, (S) amfetamiini ning kokaiini toime molekulaarsete mehhanismide selgitamine on oluline mõistmaks nende ainete mõju aju dopamiinergilise süsteemi komponentidele ning sellega seotud narkosõltuvuse ilmingutele, mis põhjustavad nii meditsiinilisi kui ka tõsiseid sotsiaalseid probleeme. Selles töös uuriti nende ainete interaktsiooni hiire aju juttkeha dopamiini transportvalguga, kasutades selleks erinevalt eelnevatest uuringutest kineetilise analüüsi meetodit radioaktiivse reporterligandi [3H]PE2I toimel, mis on tõhus dopamiini transporteri inhibiitor. Töö tulemused näitavad, et ükski kolmest uuritud ühendist ei algata nende ainete ja transportvalgu kompleksi aeglast isomerisatsiooni, mis on iseloomulik paljudele madala molekulmassiga ühendite sidumisprotessidele valkudega. Teiseks näidati, et (S) amfetamiin ning dopamiin ei mõjuta reporterligandi ja transporteri vahelise kompleksi moodustumise kiiret tasakaalu. Seega on reporterligandi nende ühendite seostumine transportvalgu erinevatele ja omavahel mitte kattuvatele sidumiskohtadele ilmne. Samal ajal aga kõik kolm ainet aeglustavad [3H]PE2I seostumise kiirele staadiumile järgnevat kompleksi aeglase isomerisatsiooni protsessi, viidates nende sidumiskohtade vaheliste allosteeriliste interaktsioonide olemasolule.