CITOMETRIA DE FLUXO MULTIPARAMÉTRICA NO DIAGNÓSTICO DA SMD PEDIÁTRICA

As síndromes mielodisplásicas (SMD) são doenças clonais que levam a uma hematopoese anormal, causando citopenias periféricas e predispondo a leucemia aguda. Seu diagnóstico na infância é mais difícil devido à sua raridade, à alta frequência de formas hipocelulares que dificultam os critérios morfológicos e a uma parcela de casos sem alterações citogenéticas. Embora o estudo das vias de maturação das linhagens hematológicas seja bem estabelecido por citometria de fluxo multiparamétrica (CFM), não existem ainda critérios diagnósticos para SMD pediátrica por citometria, exceto a contagem de blastos. Por essa razão, nosso objetivo foi descrever as diferenças nos padrões maturativos da medula óssea de crianças com SMD comparadas a medulas reacionais obtidas para diagnóstico diferencial. Esse conhecimento pode contribuir para o diagnóstico de pacientes em investigação de SMD. Materiais e métodos: Foram avaliadas amostras de medula óssea (SMD e PTI (controles)) de pacientes pediátricos (0,3 a 18 anos), através da CFM, empregando-se protocolo padronizado pelo Consórcio EuroFlow para avaliação de SMD. Utilizamos 5 tubos, cada um com 8 marcadores, para avaliação de antígenos de superfície e intracitoplasmáticos. Foram adquiridas pelo menos 100 mil células/tubo utilizando-se citômetro FACS Canto II (BD Biosciences). As análises dos dados foram realizadas no software Infinicyt e para análise estatística foi empregado o software SPSS for Windows v.20.0. Resultados: Foram estudadas 54 amostras de MO, sendo 46 de crianças com diagnóstico de SMD e 8 de controles pediátricos (PTI). O percentual de neutrófilos maduros CD10+ dentre a população de neutrófilos (CD13+/CD11b+/CD16+) foi significantemente mais baixo nas amostras de MO de pacientes com SMD (mediana:39%, intervalo: 0-69%) frente aos controles (mediana:60,3%; intervalo:31,3% – 73,9%), p = 0,013. A detecção de retenção maturativa na série neutrofílica foi significativamente mais frequente entre na SMD pediátrica (34/46; 73,9%) do que nos controles (1/8; 12,5%), p = 0,002 Dentre as células progenitoras mielóides CD34+, as células CD34+MPO+ são significativamente mais abundantes (mediana:30%, intervalo:0 – 49,1%) na SMD do que controles (mediana: 24%; intervalo:13-30,9%), p = 0,045. Além disso, houve uma diminuição significativa da proporção de progenitoras CD34+ eritróides (CD36+/CD71+/CD105+) nas SMD (mediana: 4,3%; intervalo: 0 – 20,1%) comparadas aos controles (mediana:7,5%; intervalo:1,7-12,3%), p = 0,043. Discuss