ANÁLISE IN SILICO EM AQUAPORINA-1 PLAQUETÁRIA MUTANTE E REPERCUSSÕES TROMBOGÊNICAS

Introdução/Objetivos: A aquaporina-1 (AQP1) é um canal regulador osmótico. Faz-se presente em diversas células, como hemácias e plaquetas. Nestas, aprimora a hemostasia intensificando o processo de baloneamento e o estímulo à microvesiculação e ao espalhamento da superfície pró-coagulante. Mediante estudo plaquetário em ratos knockout e em plaquetas humanas, evidenciou-se baixa relevância da AQP1 sobre a hemostasia homeostática. Porém, a ausência da AQP1 sob injúria vascular foi capaz de imiscuir a trombogênese sem alterar a hemóstase. Outrossim, a análise de oócitos de ratas portadoras da mutação AQP1-H180A/R195V demonstrou leve ganho osmótico em homeostase. Essa mutação fora induzida num dos principais locais de regulação osmótica da AQP1, o poro Ar/R. Em humanos, a mutação AQP1-A45V determina o grupo sanguíneo Colton a partir dos alelos selvagem CO*A; e mutante CO*B . Estudo brasileiro feito no hemocentro da FAMEMA constatou a frequência de 3,3% do alelo CO*B , em uma população de 275 doadores. O objetivo desta pesquisa é realizar análise in silico entre as aquaporinas mutantes AQP1-H180A/R195V e AQP1-A45V para comparar alterações conformacionais e possíveis efeitos destas sobre fenômenos trombogênicos; tendo a AQP1-A45V como enfoque. Material/Métodos: Caracterização físico-química dos aminoácidos será feita sob Ala e Val, que se encontram em voga na mutação AQP1-A45V, por meio do índice de hidropatia. Análise in silico das aquaporinas mutantes será realizada em AQP1-A45V e AQP1-H180A/R195V mediante o programa precitprotein. Resultados: O índice de hidropatia determina o caráter hidrofílico dos aminoácidos com base na variação da energia livre de Gibbs (ΔG). Valores negativos de ΔG indicam espontaneidade de um processo; positivos, processo não espontâneo. Relativo à Ala e à Val, têm-se os seguintes valores: ΔGAla = -1,8; ΔGVal = -4,2. O precitprotein analisa a estrutura secundária das AQP1s mutantes em relação à selvagem. Pela análise, a AQP1-A45V teve aumento de 3 coil (c), de 1 fita-β, β, e de 2 α-hélices, α, estando uma destas em Pro193. Já a AQP1-H180A/R195V teve aumento de 3 (c), de 1 β e de 5 α estando uma destas em Pro193 e Ala194. Discussão: O índice de hidropatia da Ala é maior que o da Val. Logo, esta é mais hidrofílica. Apesar da AQP1 mutante induzida de rato ter modificado o poro regulatório Ar/R da AQP1 nos resíduos His180 e Arg195, as alterações conformacionais se deram no poro regulatório NPA havendo aumento de α nos resíduos Pro193 e Ala