Aula prática de Fotossíntese: Demonstração da reação de Hill em cloroplastos com dissipação de energia por fluorescência mediante desacoplamento ou inibição dos fotossistemas pelo herbicida Diuron

Na fotossíntese, o processo fotoquímico de transferência de elétrons é facilmente demonstrado através da reação de Hill, onde aceptores de elétrons artificiais são reduzidos por suspensões ativas de cloroplastos na presença de luz. Entretanto, não é comum mostrar no ensino de graduação o destino da energia luminosa absorvida pela clorofila quando os fotossistemas não estão funcionais. Apresentamos uma proposta de aula prática que consiste em uma adaptação da reação de Hill usando cloroplastos intactos de espinafre, que inclui a visualização de dissipação de energia por fluorescência e efeito dose/resposta em cloroplastos lisados ou inibidos pelo hebicida DIURON. Esta aula prática, destinada às disciplinas de Bioquímica e Biofísica para cursos de graduação de Química, Ciências Biológicas e Engenharias Florestal, Ambiental e Agronômica, tem como objetivos complementar os princípios básicos de fotoquímica demonstrados através da reação clássica de Hill, com princípios de fotofísica através da dissipação de energia por fluorescência da clorofila, melhorando a compreensão do processo da fotossíntese, e introduzindo o conceito de fluorescência e sua aplicação como ferramenta bioanalítica moderna para monitorar a fotossíntese em plantas e ecossistemas vegetais.