Purification and characterization of the commercialized, cloned Bacillus megaterium alpha-amylase. Part I: Purification and hydrolytic properties

Mit einem amylolytischen Enzym, das urspruenglich aus Bacillus megaterium isoliert worden war, konnte gezeigt werden, dass bei der Verzuckerung durch Verringerung der Restmenge an Oligosacchariden die Dextrosemenge auf ein Maximum ansteigt. Das jetzt in einem gentechnisch behandeltem Stamm von Bacillus subtilis kommerziell hergestellte Enzym wurde bis zur Homogenitaet gereinigt. Eine Kombination aus Gelpermeations-Chromatographie in Gegenwart von 1,0 M NaCl und Chromatofokussierung zwischen pH 9,0 und 7,0 wurde zum Erhal t des reinen Enzyms verwendet. Das Molekulargewicht der Bacillus megaterium-Alpha-Amylase betrug 59.000 aufgrund von SDS-Gelelektrophorese, und der isoelektrische Punkt bei pH 9,9 und 9,0. Es zeigte sich, dass das Enzym sowohl Hydrolyse-als auch Transferaseaktivitaet besitzt. Das Enzym hydrolisierte eine breite Varietaet von loeslichen Substraten. Die Hydrolysegeschwindigkeit war bei loeslicher Staerke am groessten; Alpha(1,6)-verzweigte Substrate und Cyclodextrine wurden eher langsamer hydrolysiert. [S-91-05885]