Synthesis of Deoxyoligonucleotide Linker Fragments for Genetic Engineering Using Improved Preparative and Analytical Techniques

For studies on the expression of recombinant DNA, linker fragments have been prepared which serve to introduce specific points of cleavage on the DNA as well as the protein level. Such linkers were designed for cyanogen bromide as well as for collagenase cleavage of fused proteins. The preparation was done according to the triester synthesis scheme using improved and simpler routes to functionalized dinucleotide building blocks. Field desorption mass spectrometry was used as a routine tool for the identification and control of the purity of these units. Synthese von Desoxyoligonucleotid‐Fragmenten zur Anwendung in der Genverknüpfung unter Einsatz verbesserter präparativer und analytischer Methoden Zur Untersuchung der Expression rekombinanter DNS haben wir Oligonucleotide als Genverknüpfungsfragmente dargestellt, die spezifische Spaltstellen sowohl in die DNA wie in das zugehörige Protein einführen. Ihr Aufbau ist so, daß die Spaltung eines Fusionsproteins entweder durch Bromcyan oder durch Kollagenase erfolgen kann. Die Synthese wurde nach dem Triesterschema durchgeführt, wobei schnellere und einfachere Wege zu funktionalisierten Dinucleotid‐Baueinheiten entwickelt wurden. Die Felddesorptions‐Massenspektrometrie diente als Routine‐methode für den Strukturbeweis und die Reinheitskontrolle dieser Baueinheiten.