紫茎泽兰致山羊中毒的机理初步研究

紫茎泽兰（Eupatorium adenophorum）系菊科泽兰属多年生半灌木草本植物,在我国外来入侵有毒恶性杂草中排名第一。研究表明,紫茎泽兰作为有毒植物,其有毒成分能对家畜产生毒性作用,尤其对肝、肾及脾脏均有不同程度毒性作用,可致小鼠肝毒性、肝细胞凋亡及肝抗氧化机能下降、山羊生长停滞及家畜流产等,但已有研究文献仅停留在临床病理层面,未深入探索紫茎泽兰饲喂反刍动物对其肝细胞周期及凋亡分子机制的影响。目的:试验旨在研究紫茎泽兰全草饲喂萨能奶山羊对其肝细胞周期及凋亡的影响。方法:16只萨能奶山羊随机均分为对照组与试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,分别饲喂0、40%、60%、80%紫茎泽兰试验料,连续饲喂3个月,立即取萨能奶山羊脾脏制成细胞匀浆,采用流式细胞术根据Annexin-V-FITC/PI双染法检测凋亡及PI单染法检测细胞周期变化;TUNEL检测细胞凋亡程度;qRT-PCR检测Caspase-3、-8、-9、Bax、Bcl-2表达丰度。结果:Annexin-V-FITC/PI双染法检测出肝细胞早期及晚期凋亡数量极显著增加,TUNEL结果说明总凋亡数显著增加,且存在明显剂量效应;细胞周期检测发现各试验组G0/G1期细胞比例增加,S期与G2+M细胞数比减少,表明细胞形成G0/G1期阻滞;qRT-PCR结果发现,促凋亡基因Caspase-3、-9、Bax表达丰度显著升高,抑凋亡基因Bcl-2水平显著降低,Caspase-8无显著变化。结论:紫茎泽兰具有诱导萨能奶山羊肝细胞凋亡与阻滞细胞复制周期的潜力。试验结果为紫茎泽兰作为饲料开发与其致肝毒性机理提供了理论依据。