控制辣椒辣味基因Pun1的克隆及表达

[目的]对控制辣椒辣味基因pun1的克隆及表达进行研究。[方法]以益都红（Capsicum annuum L）为材料,获得Capun]基因cDNA序列，全长1457bp，编码440个氨基酸；研究了其瞬时表达、原核表达和实时荧光定量表达。[结果]系统进化分析显示，CAPUN1与同属C．chinense辣椒PUN1遗传距离最近，为0．0193。构建植物表达载体pCAM-Pun1-GFP转化烟尊瞬时表达．发现融合基因Pun1：GFP编码的蛋白定位在细胞膜上。构建原核表达载体，通过SDS-PAGE和Western Blot检测，得到了一个分子量为63ku的诱导蛋白。实时荧光定量表达发现Pun1基因存花后30d表达量最高，而后开始下降．花后40和45d基本不表达。[结论]该研究为研究辣椒辣味基因Pun1的调控分子机制提供了信息和参考。