丁香疫霉病菌PCR和实时荧光PCR检测

为了快速、准确地检测丁香疫霉病菌（Phytophthora syringae，PSY），根据GeneBank中PSY的ITS序列设计特异引物Psyl／Psy2和探针P-Psy，建立了常规PCR和实时荧光PCR检测方法。利用引物Psyl／Psy2扩增供试的26株PSY能得到585bp的预期目标条带，但扩增其它61个非PSY供试菌株不能得到预期产物，检测灵敏度为12Pg菌丝DNA；探针P-Psy对供试26株PSY表现为阳性扩增，而对其它菌株和空白对照均表现为阴性扩增，检测灵敏度可达120fg菌丝DNA，比常规PCR高100倍：引物Psyl／Psy2和探针P．Psy对5g土壤中PSY卵孢子的检测灵敏度分别为20000个和200个。样品检测试验表明两种PCR方法可用于口岸植物检疫中快速、准确和特异地检测丁香疫霉病菌。