基于28SrRNA基因序列的巢式PCR方法快速检测甲真菌病病原菌种

目的应用基于28SrRNA基因序列的巢式PCR的方法快速诊断甲真菌病。方法液氮冷冻甲标本，微量法提取DNA，应用特异性引物，巢式PCR方法扩增DNA。结果本组共收集180例直接镜检和培养均为阳性的甲标本，FirstPCR144例阳性，NestPCR168例阳性。其中127例标本经PCR扩增可产生约137bp目的片段，为红色毛癣菌；26例标本经PCR扩增可产生约102bp目的片段，为须癣毛癣菌；10例标本经PCR扩增可产生约445bp目的片段，为白念珠菌；5例标本经PCR扩增可产生约170bp目的片段，为曲霉。巢式PCR敏感性为93．33％（168／180），特异性为100％（168／168）。结论此方法是一种快速、敏感、特异的诊断甲真菌病的方法。