NiR-483-3P下调RIOK3蛋白表达促进神经母细胞瘤的增殖和迁移
目的探讨microRNA-483-3P(miR-483-3P)对神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响,预测并验证miR-483-3P的靶基因及其对靶基因的影响。方法miRNA微阵列芯片结果发现miR-483-3P在神经母细胞瘤中表达上调,差异倍数显著,并居于差异表达miRNA的首位。利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的miR-483-3Pinhibitor、miR-483-3Pinhibitor的阴性对照序列分别瞬时转染人人神经母细胞瘤SH-SY-5Y细胞株中,RT-qPCR技术检测各组中miR-483-3P的表达水平,CCK-8法检测各组癌细胞的增殖情况...
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Veröffentlicht in: | 临床小儿外科杂志 2016, Vol.15 (2), p.150-155 |
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1. Verfasser: | |
Format: | Artikel |
Sprache: | chi |
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creator | 李晓 鹿洪亭 董蒨 郝希伟 赵静 刘铭 |
description | 目的探讨microRNA-483-3P(miR-483-3P)对神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响,预测并验证miR-483-3P的靶基因及其对靶基因的影响。方法miRNA微阵列芯片结果发现miR-483-3P在神经母细胞瘤中表达上调,差异倍数显著,并居于差异表达miRNA的首位。利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的miR-483-3Pinhibitor、miR-483-3Pinhibitor的阴性对照序列分别瞬时转染人人神经母细胞瘤SH-SY-5Y细胞株中,RT-qPCR技术检测各组中miR-483-3P的表达水平,CCK-8法检测各组癌细胞的增殖情况,Transwell小室实验检测各组癌细胞的体外侵袭和迁移能力。利用生物信息学软件预测miR-483-3P的靶基因并用荧光素酶报告基因检测实验、West-emblot实验加以验证。结果与癌旁正常组织相比,miR-483-3P在神经母细胞瘤中高表达(P〈0.01);与阴性对照组相比,癌细胞转染miR-483-3Pinhibitor后,miR-483-3P表达显著下调(P〈0.01),细胞的增殖情况和体外迁移能力均降低(P〈0.05)。生物信息学软件预测出RIOK3是miR-483-3P的靶基因之一,当细胞转染了miR-483-3Pinhibitor后荧光酶活性升高(P〈0.01)。与阴性对照组相比,当细胞转染了miR-483-3Pinhibitor后在蛋白质水平RIOK3表达升高(P〈0.01)。结论RIOK3是miR-483-3P的靶基因之一,miR-483-3P能下调RIOK3的表达并显著促进神经母细胞瘤细胞的增殖和体外迁移。 |
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