NiR-483-3P下调RIOK3蛋白表达促进神经母细胞瘤的增殖和迁移

目的探讨microRNA-483-3P（miR-483-3P）对神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响，预测并验证miR-483-3P的靶基因及其对靶基因的影响。方法miRNA微阵列芯片结果发现miR-483-3P在神经母细胞瘤中表达上调，差异倍数显著，并居于差异表达miRNA的首位。利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的miR-483-3Pinhibitor、miR-483-3Pinhibitor的阴性对照序列分别瞬时转染人人神经母细胞瘤SH-SY-5Y细胞株中，RT-qPCR技术检测各组中miR-483-3P的表达水平，CCK-8法检测各组癌细胞的增殖情况，Transwell小室实验检测各组癌细胞的体外侵袭和迁移能力。利用生物信息学软件预测miR-483-3P的靶基因并用荧光素酶报告基因检测实验、West-emblot实验加以验证。结果与癌旁正常组织相比，miR-483-3P在神经母细胞瘤中高表达（P〈0．01）；与阴性对照组相比，癌细胞转染miR-483-3Pinhibitor后，miR-483-3P表达显著下调（P〈0．01），细胞的增殖情况和体外迁移能力均降低（P〈0．05）。生物信息学软件预测出RIOK3是miR-483-3P的靶基因之一，当细胞转染了miR-483-3Pinhibitor后荧光酶活性升高（P〈0．01）。与阴性对照组相比，当细胞转染了miR-483-3Pinhibitor后在蛋白质水平RIOK3表达升高（P〈0．01）。结论RIOK3是miR-483-3P的靶基因之一，miR-483-3P能下调RIOK3的表达并显著促进神经母细胞瘤细胞的增殖和体外迁移。