非变性原位杂交技术在芝麻染色体识别上的探索与应用

【目的】研究和确定芝麻ND-FISH最优试验条件，并对其在芝麻染色体识别中的可行性进行探索。【方法】以寡聚核苷酸（AC）8为探针，研究不同洗脱强度、酶解时间和杂交时间对ND-FISH的影响，确定芝麻ND-FISH最优试验方案。【结果】芝麻ND—FISH最优方案：制片在浓度100μg.mL^-1RNaseh酶解1h，探针浓度6μL（20ng.μL^-1），杂交4h，4×SSC/0．2％Tween20溶液洗脱10min；18条染色体存在（AC）8杂交信号，其中，14条染色体上存在较强杂交信号，4条染色体上有较弱杂交信号，结合染色体长度及臂比，18条染色体可有效识别。【结论】利用ND-FISH技术、以（Ac）。为探针成功识别栽培芝麻的18条染色体。