多重POR检测四种食源性病原弧菌

[目的]建立在扩增内标存在下同时快速检测溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌4种食源性致病菌的五重PER方法。[方法]以细菌16SrRNA基因为扩增内标靶序列，针对溶藻弧菌gyrB基因、副溶血弧菌GOllagenase基因、创伤弧菌vvhA基因、霍乱弧菌ompW基因，分别设计特异性引物，建立多重PCR体系，对其灵敏度和特异性进行评价，并将建立的五重PCR应用于弧菌的筛选。[结果]建立的多重PCR检测体系对混合模板中副溶血弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌的灵敏度达10CFU／mL，霍乱弧菌的灵敏度达105CFU／mL，经特异性评价证实其特异性好，并能有效指示PCR反应的假阴性，将建立的多重PCR应用于69株疑似弧菌菌株的鉴定，其结果与生理生化鉴定结果一致。[结论]该方法能够快速、灵敏、准确地检测溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌和霍乱弧菌4种食源性致病菌，灵敏度高，并能有效指示PCR反应的假阴性，适用于食品中常见致病性弧菌的快速筛检。