珍稀细茎石斛LEAFY同源基因的克隆及在石斛药材鉴定中的意义

本文基于兰科已有的LEAFY（LFY）同源基因保守区设计引物，对细茎石斛（DendrobiummoniliformefL．1sw．）的该基因进行克隆及序列分析。通过普通PCR及Tail．PCR技术得到LFY同源基因——DP儿Fy，全长共3575bp，包含3个外显子和2个内含子。将De比Fy基因外显子序列提交到NCBI进行BLAST比对，发现该基因与兰科其他植物同源基因序列相似度很高，均达80％以上，其中与蝴蝶兰（Phalaenopsishybridcultivar）LFY同源基因（PhalLFY）和文心兰（OncidiumGowerRamsey）LFY同源基因相似度分别达84％和90％。应用MP的方法，根据不同物种LFY同源基因进行系统发生关系分析，发现细茎石斛与文心兰、蝴蝶兰亲缘关系最近。氨基酸序列比对分析结果表明，该基因C端编码的氨基酸相对更为保守。从DenLFY基因外显予和内含子单独分析来看，外显子的获得及其编码氨基酸的推测对于LFY，基因功能的研究是一个开端，而内含子2在细茎石斛和铁皮石斛fDendrobiumofficinaleKimuraetMigo）中存在长度差异，在石斛药材鉴定方面有着很大的应用潜力。