五种破壁方法提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense总RNA效果的比较
为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法,我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁,再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA,最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高,OD260/OD280=2.093±0.264,RNA浓度为(0.134±0.021)μg/μL,RNA制备效率为(26.76±4.10)μg/g菌丝体,并且该方法操作简便,重复性最好,...
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Veröffentlicht in: | 寄生虫与医学昆虫学报 2011, Vol.18 (4), p.242-246 |
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Format: | Artikel |
Sprache: | chi |
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Online-Zugang: | Volltext |
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Zusammenfassung: | 为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法,我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁,再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA,最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高,OD260/OD280=2.093±0.264,RNA浓度为(0.134±0.021)μg/μL,RNA制备效率为(26.76±4.10)μg/g菌丝体,并且该方法操作简便,重复性最好,是制备P.guiyangense菌株总RNA的首选破壁方法。 |
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ISSN: | 1005-0507 |