肿瘤坏死因子诱导U937细胞凋亡过程中IkB—α蛋白表达的研究

目的：了解肿瘤坏死因子（TNF－α）诱导U937细胞凋亡过程中IkB-α蛋白的表达、降解及亚细胞定位，并探讨其降解机制。方法：用荧光显微镜观察TNF－α诱导细胞调过程中U937钠IkB-α蛋白的表达及亚细胞定位，用流式细胞术分析IkB-α蛋白的变化及降解情况，并行蛋白酶抑制剂－－对甲苯磺酰－L－苯丙氨酸氯甲基甲酮（TPCK）阻断实验，探讨细胞内IkB-α蛋白变化的可能机制；用流式细胞术分析U937细胞凋亡。结果：（1）IkB-α分子多呈环状分布于整个胞浆，胞核内则无。（2）TNF－α刺激后，胞浆中仅见少许IkB-α分子，胞核内无；流式细胞术证实TNF－α刺激后一定时间内IkB-α蛋白表达水平逐渐降低。（3）TPCK阻断后，IkB-α分子仍呈环状分布于整个胞浆，胞核内则无。流式细胞术证实在对应时间内其表达明显高于TNF－α组。（4）TNF－α诱导的U937细胞凋亡率为（60．73±1．61）％。结论：（1）在TNF－α诱导的U937细胞凋亡过程中，存在IkB-α蛋白降解，提示 核因子－kB的激活。（2）IkB-α蛋白降解需TPCK敏感的蛋白酶参与。（3）TPCK敏感的蛋白酶也参与了TNF－α诱导U937细胞凋亡。