反义封闭MMP-9基因表达对胶质母细胞瘤细胞系增殖的影响

目的探讨反义封闭胶质瘤细胞MMP-9基因表达对胶质瘤细胞增殖的影响。方法利用基因重组的方法构建正义和反义MMP-9重组体;经脂质体介导,分别将pcDNA3.0空载质粒、正义重组体、反义重组体转染TJ905细胞;通过RT-PCR和Western blot检测转染细胞MMP-9的mRNA和蛋白表达水平;利用免疫组织化学法分析了转染细胞中MMP-9和Ki-67的表达。结果经限制性酶切鉴定和DNA测序分析,基因重组成功,且正义与反义重组体插入位点间的序列方向正好相反。与TJ905对照组、空载体组和正义对照组相比较,转染反义重组体后的TJ905细胞中MMP-9mRNA和蛋白的表达水平明显下降（P〈0.001）。转染空载体和正义重组体后,TJ905细胞内MMP-9mRNA和蛋白的表达水平与未进行转染的TJ905细胞相比差异无统计学差异（P〉0.05）。免疫组织化学结果显示反义封闭有效,MMP-9的表达下调,TJ905细胞增殖活性下降。结论转染反义MMP-9重组体可以有效抑制胶质母细胞瘤细胞的MMP-9基因的表达,同时可以抑制肿瘤细胞的增殖。