体积排阻色谱法（SEC）对重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子的复性并同时纯化

采用体积色谱法对由E．coli表达的重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（rhGM—CSF）复性与同时纯化工艺进行了研究。分别讨论了不同浓度的脲、流动相pH以及在流动相中添加不同比例的GSSG／GSH对rhGM—CSF复性与同时纯化的影响。结果表明：三者对其复性效率和质量回收率均有较大的影响，GSSG／GSH可有效提高rhGM—CSF二硫键的正确对接和复性效率，而低浓度的脲则可有效抑制蛋白沉淀，可大大提高质量回收率。在最优化条件下，SEC可在30min内使rhGM—CSF在分离纯化的同时进行复性，其比活为1．31×10^7IU／mg，质量回收率为42．3％，纯度可达到86．4％。