リアルタイムPCR法による腸管出血性大腸菌の食品での高感度検出のためのDNA抽出法

迅速かつ安価なDNA抽出法であるアルカリ熱DNA抽出法を食品中の腸管出血性大腸菌の検出のためのリアルタイムPCRにおいて評価した．牛レバー，牛ひき肉，豚スライス肉，チーズ，レタス，カイワレ大根，トマトおよびホウレンソウでのstx遺伝子とO抗原遺伝子検出において，アルカリ熱DNA抽出物は高感度の検出（102～104 CFU/mL）を示し，これはプロティナーゼK溶菌とシリカメンブレンによる精製工程を含む市販DNA抽出キットと同等の検出感度であった．アルカリ熱抽出とキットでのDNA濃度と純度には違いがあったが，リアルタイムPCRの感度は同様であった．これらの結果から，アルカリ熱DNA抽出法は，リアルタイムPCRでの食品分析にとって有用な方法であることが示された．