RT-LAMP法によるPotato spindle tuber viroid (PSTVd)の検出

Potato spindle tuber viroid (PSTVd)はジャガイモ、トマトに甚大な被害を及ぼす我が国が侵入を警戒している重要病原体である。本ウイロイドは汁液伝染の他、種子伝染することが知られている。植物検疫においてはこれまで、RT-PCRによって本ウイロイドの検出を行ってきた。しかし、RT-PCRは操作が煩雑であり検出まで時間がかかる等の問題がある。そこで、簡易、迅速、高感度の遺伝子増幅法であるRT-LAMP法による、PSTVdの検出について検討した。抽出核酸を鋳型としてRT-LAMPを行ったところ、ジャガイモ葉、塊茎、種子及びトマト葉、種子から約60分以内に特異的にPSTVdを検出することができた。RT-PCR法と検出感度を比較したところ、RT-LAMP法の方が約10倍感度が高かった。また、ジャガイモ葉及びトマト葉からは、核酸抽出を行わず磨砕汁液を鋳型としても、さらにトマト葉では、葉を昆虫針で刺し、針先に付着した汁液を鋳型としても検出可能であった。