粗汁液を用いた(R-)PCR法によるウイルスの簡易検出

Reverse ranscripion（R）?polymerase chain reacion（PCR）法はウイルス検出に極めて有効な手段である。しかし、従来は一般にウイルス感染葉から全核酸を精製するため、操作が煩雑であり、多検体を検定する場合のネックとなっている。そこで、0.1mm厚のビニル袋に感染葉10mgと溶液1mlを加えて摩砕した粗汁液（1.0％（w／v））を用いて（R?）PCR法によるウイルス検定法について検討した。Broad bean wil virusに感染したホウレンソウ及びフクジュソウ、Adonis mosaic virusに感染したフクジュソウ、omao yellow leaf curl virusに感染したトマトを供試した結果、保存条件の異なるウイルス感染葉から核酸を精製せずに直接、ウイルスの検出が可能であった。また、短時間（2時間以内）であれば、25℃の室温でウイルス検定が可能であり、4℃で操作する必要は無かった。これにより、ウイルス感染葉からRNAやDNAの抽出、精製が不要となり、また、機器の制約が無いことから多数の検体ウイルスの検定に対応することが期待できた。