Pharmacothérapie ciblée de variants d'ABCB4, le transporteur biliaire de phospholipides

ABCB4/MDR3 est une protéine transmembranaire qui assure la sécrétion de la phosphatidylcholine, un composant fondamental de la bile, au niveau de la membrane canaliculaire des hépatocytes. De nombreuses mutations qui touchent le gène encodant ce transporteur sont à l'origine de pathologies cholestatiques rares. La cholestase intrahépatique familiale progressive de type 3 (PFIC3) représente la forme la plus sévère de ces maladies. À ce jour, environ 50 % des patients ne répondent pas aux traitements conventionnels, faisant de la transplantation hépatique l'ultime alternative thérapeutique pour ces jeunes patients. Cette thèse a eu pour objectif d'identifier par une approche de criblage à haut débit, de nouveaux correcteurs pharmacologiques du trafic intracellulaire de trois variants d'ABCB4 (I541F, L556R et I490T), retenus dans le réticulum endoplasmique. Les résultats des analyses biochimiques et morphologiques nous ont permis de valider, dans nos modèles cellulaires, trois correcteurs de la maturation et de la localisation membranaire de deux variants. Néanmoins, à cause d'un effet inhibiteur de ces molécules sur la fonction d'ABCB4, un seul correcteur a pu restaurer de manière significative la fonction de ces deux variants. En association avec l'ivacaftor (VX 770, Kalydeco®), un modulateur d'activité approuvé pour la mucoviscidose, une amélioration et une potentialisation de l'activité a été obtenue. Dans le but d'explorer le mécanisme d'action de ses composés, des analyses de docking moléculaire in silico ont été réalisées et suggèrent une interaction des drogues avec les résidus d'ABCB4 impliqués dans la liaison/hydrolyse de l'ATP expliquant potentiellement l'effet inhibiteur de la fonction. De plus, in vitro, les molécules augmentent la stabilité à la membrane plasmique d'ABCB4-WT et semblent inhiber sa dégradation lysosomale. De façon intéressante, l'effet correcteur de ces molécules est conservé pour un autre variant intracellulaire du transporteur d'acides biliaires ABCB11. Cela permet d'envisager un traitement consensus des déficits des deux transporteurs ABC, ABCB4 et ABCB11. Pour conclure, nous avons identifié de nouveaux composés correcteurs pour les variants d'ABCB4 retenus au niveau intracellulaire. Ces résultats ouvrent la voie à leur optimisation chimique afin de fournir de nouveaux médicaments candidats comme alternative potentielle à la transplantation hépatique pour les patients atteints de formes sévères de maladies liées aux déficits d