Die Rolle der Antikörper sowie deren Epitop-Spezifität in der MP4-induzierten experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis bei der B-Zell-defizienten JHT-Maus
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Köln
2019
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ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
___________________________________________________
13
LI
MULTIPLE
SKLEROSE
______________________________________________
13
1.1.1
EPIDEMIOLOGIE
UND
KLINISCHER
VERLAUF
_____________________________
13
1.1.2
AETIOLOGIE
____________________________________________________
14
1.1.2.1
GENETISCHE
FAKTOREN
__________________________________________
14
1.1.2.2
UMWELTEINFLUESSE
_____________________________________________
15
1.1.3
PATHOGENESE
__________________________________________________
15
1.1.3.1
INFLAMMATION
_______________________________________________
15
1.1.3.2
DEMYELINISIERUNG
____________________________________________
16
1.1.3.3
AXONDEGENERATION
___________________________________________
17
1.2
TIERMODELIE
DER
MS
____________________________________________
18
1.2.1
EXPERIMENTELLE
AUTOIMMUNE
ENZEPHALOMYELITIS
____________________
20
1.2.1.1
GESCHICHTE
_________________________________________________
20
1.2.1.2
INDUKTION
__________________________________________________
21
1.2.1.3
DAS
FUSIONSPROTEIN
MP4
_____________________________________
21
1.2.1.4
DIE
MP4-INDUZIERTE
EAE
_____________________________________
22
1.3
DIE
ROLLE
DER
B-ZELLEN
UND
AK
FIIR
DIE
MS
________________________
24
1.3.1
HINWEISE
AUF
EINE
B-ZELL-AK-VERMITTELTE
PATHOGENESE
DER
MS
_______
24
1.3.2
B-ZELL-VERMITTELTE
EAE-MODELLE
________________________________
26
1.3.3
DIE
B-ZELL-AK-ABHAENGIGKEIT
DER
MP4-INDUZIERTEN
EAE
____________
27
1.3.4
DIE
EPITOP-SPEZIFITAET
DER
EAE-IMMUNREAKTIONEN
__________________
28
1.4
ZIELSETZUNG
__________________________________________________ 30
2
MATERIAL
UND
METHODEN_______________________________________
32
2.1
MAEUSE
_______________________________________________________
32
2.2
EAE
_________________________________________________________
33
2.2.1
HERSTELLUNG
DER
IMMUNISIERUNGSLOESUNG
____________________________
33
2.2.2
EAE-INDUKTION
_______________________________________________
33
2.2.3
SERUMGEWINNUNG
_____________________________________________
34
2.2.4
ELISA
______________________________________________________
34
2.2.5
SERUMTRANSFER
________________________________________________
34
2.2.6
KLINISCHE
EINTEILUNG
DER
EAE
___________________________________
35
2.3.
GEWEBEFIXIERUNG
______________________________________________
35
2.3.1
HERSTELLUNG
DER
PERFUSIONSLOESUNG
________________________________
35
2.3.2
INTRAKARDIALE
PERFUSION
_________________________________________
36
2.3.3
GEWEBEPRAEPARATION
____________________________________________
37
2.3.4
EPON-EINBETTUNG
______________________________________________
37
2.3.5
HERSTELLUNG
DER
SEMI-
UND
ULTRADUENNSCHNITTE
_______________________
38
2.4
HISTOLOGISCHE
BEURTEILUNG
______________________________________
39
2.4.1
LICHTMIKROSKOPIE
(SEMIDUENNSCHNITTE)
____________________________
39
2.4.2
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
(ULTRADUENNSCHNITTE)
________________________40
2.5
AUSWERTUNG
___________________________________________________ 40
2.5.1
LICHTMIKROSKOPIE
(SEMIDUENNSCHNITTE)
____________________________
40
2.5.2
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
(ULTRADUENNSCHNITTE)
________________________
42
2.5.2.1
ANZAHL
DER
PATHOLOGISCHEN
AXONE
PRO
GESAMTFLAECHE
_______________44
2.5.2.2
G-RATIO
____________________________________________________
45
2.5.2.3
KONTROLLWERT
(RANGE)
_________________________________________46
2.5.2.4
FLAECHE
DER
DEMYELINISIERENDEN
AXONE
PRO
GESAMTFLAECHE
___________
47
2.6
STATISTISCHE
DARSTELLUNG
_________________________________________
49
3
E
RGEBN
ISSE
___________________________________________________
50
3.1
SCORE-EINTEILUNG
DER
ULTRADUENNSCHNITTE
__________________________
50
3.1.1
ANTI-MP4-AK
TRANSFERIERTE
MAEUSE
ENTWICKELN
EINEN
MAESSIG
BIS
HOHEN
PATHOLOGISCHEN
SCORE
_______________________________________________
50
3.1.2
EXTRA
IL-REAKTIVES
SERUM
VERURSACHT
NUR
MILDE
MYELINLAESIONEN,
DIE
SICH
IN
EINEM
NIEDRIGEN
SCORE
WIDERSPIEGELN
__________________________________
52
3.1.3
DEN
HOECHSTEN
PATHOLOGISCHEN
SCORE
IN
BEZUG
AUF
DEN
MYELINSCHADEN
ERZIELEN
ANTI-INTRA
I-AK
TRANSFERIERTE
JNT-MAEUSE
________________________
54
3.1.4
ANTI-INTRA
II-AK
VERURSACHEN
BEI
MP4-IMMUNISIERTEN
JNT-MAEUSEN
NUR
MILDE
MYELINSCHAEDEN
_______________________________________________
56
3.1.5
ZUSAMMENFASSUNG
DER
HISTOLOGISCHEN
UNTERSUCHUNG
MITTELS
SCORE-
EINTEILUNG
MIT
EINEM
3000ER
OBJEKTIV
_________________________________
58
3.2
DETAILLIERTE
ANALYSE
DER
PATHOLOGISCHEN
AXONE
PRO
GESAMTFLAECHE
__
60
3.2.1
VERGLEICH
DER
MYELINPATHOLOGIEN
INNERHALB
EINER
PEPTIDGRUPPE
________
61
3.2.1.1
JNT-MAEUSE,
DIE
MP4-REAKTIVES
SERUM
TRANSFERIERT
BEKOMMEN
HABEN,
WEISEN
IM
VERGLEICH
ZUEINANDER
SIGNIFIKANTE
PATHOLOGIEUNTERSCHIEDE
AUF
_____
61
3.2.1.2
ANTI-EXTRA
II-AK
TRANSFERIERTE
JNT-MAEUSE
ZEIGEN
LEICHTE
UNTERSCHIEDE
IN
BEZUG
AUF
DIE
ANZAHL
DER
DEMYELINISIERENDEN
AXONE
PRO
FLAECHE
___________
62
3.2.1.3
IM
VERGLEICH
DER
ANTI-INTRA
I-AK
TRANSFERIERTEN
JUT-MAEUSE
ZEIGT
SICH
EIN
SIGNIFIKANTER
UNTERSCHIED
IN
BEZUG
AUF
MYELINPATHOLOGIEN
________________
63
3.2.1.4
EIN
SIGNIFIKANTER
UNTERSCHIED
KANN
ZWISCHEN
DEN
ANTI-INTRA
II-AK
TRANSFERIERTEN
JNT-MAEUSEN
IN
BEZUG
AUF
DEMYELINISIERENDE
LAESIONEN
FESTGESTELLT
WERDEN
________________________________________________ _________
64
3.2.2
VERGLEICH
DER
PEPTIDGRUPPEN
BEZOGEN
AUF
DIE
VERSCHIEDENEN
MYELINPATHOLOGIEN
_________________________________________________
66
3.2.2.1
SOWOHL
EXTRAZELLULAER-,
ALS
AUCH
INTRAZELLULAER-GERICHTETE
AK
VERURSACHEN
DEMYELINISIERENDE
PROZESSE
_________________________________________
66
3.2.2.2
DIE
ANZAHL
DER
AXOLYTISCHEN
NERVENFASERN
PRO
FLAECHE
IST
BEI
DEM
TRANSFER
VON
ANTI-MP4-
UND
ANTI-INTRA
I-AK
STARK
ERHOEHT
_________________
67
3.2.2.3
IN
BEZUG
AUF
DIE
GESAMTZAHL
DER
DEMYELINISIERENDEN
UND
AXOLYTISCHEN
NERVENFASERN
PRO
FLAECHE
ZEIGEN
ANTI-MP4-
UND
ANTI-INTRA
I-AK
TRANSFERIERTE
JUT-
MAEUSE
DIE
HOECHSTEN
SCHADENSWERTE
___________________________________
68
3.2.2.4
MP4-
UND
INTRA
I-REAKTIVE
AK
ERZIELEN
DIE
HOECHSTE
ANZAHL
AN
DEMYELINISIERTEN
NERVENFASERN
PRO
FLAECHE
_____________________________
70
3.2.2.5
REMYELINISIERUNGEN
KONNTEN
BEI
KEINER
AK-TRANSFERIERTEN
PEPTIDGRUPPE
FESTGESTELLT
WERDEN
_________________________________________________
71
3.3
FLAECHENBEZOGENE
ANALYSE
DER
DEMYELINISIERENDEN
UND
AXOLYTISCHEN
AXONE
PRO
GESAMTFLAECHE
__________________________________________
72
3.3.1
ANTI-EXTRA
IL-GERICHTETE
AK
VERURSACHEN
FLAECHENBEZOGEN
DEN
GROESSTEN
DEMYELINISIERENDEN
SCHADEN
________________________________________
72
4
DISKUSSION
___________________________________________________
74
4.1
ZIEL-EPITOPE
DER
AK-VERMITTELTEN
IMMUNANTWORT
_________________
74
4.1.1
EXTRAZELLULAERE
EPITOPE___________________________________
74
4.1.2
INTRAZELLULAERE
EPITOPE
___________________________________
75
4.2
UEBER
WELCHE
MECHANISMEN
KOENNEN
INTRAZELLULAERE
EPITOPE
VON
AK
ERKANNT
WERDEN?
_________________________________________________
77
4.3
AK
IM
FOKUS
ZUKUENFTIGER
THERAPIEANSAETZE?
_______________________
79
4.3.1
AK
ALS
THERAPEUTISCHE
WERKZEUGE
________________________________
79
4.3.2
AK
UND
B-ZELLEN
ALS
ANGRIFFSPUNKTE
THERAPEUTISCHER
MASSNAHMEN
_____
80
4.4
SCHLUSSFOLGERUNG
_______________________________________________
83
5
ZUSAMMENFASSUNG
____________________________________________
84
6
LITERATURVERZEICHNIS
___________________________________________
86
7
LEBENSLAUF
99
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