Einfluss von Progesteron auf die präimplantatorische Embryonalentwicklung des Rindes in vitro
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen
DVG Service GmbH
2016
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Einfluss von Progesteron
auf die präimplantatorische Embryonalentwicklung
des Rindes in vitro
INAUGURAL-DISSERTATION
zur Erlangung des Grades einer Doktorin
der Veterinärmedizin
- Doctor medicinae veterinariae -
(Dr med vet )
vorgelegt von
Katharina-Sophia Knauer
Soltau
Hannover 2016
Inhaltsverzeichnis
«
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3
«t-
Einleitung 1
Schrifttum 3
2 1 In-vitro-Produktion von Embryonen 3
211 Modifikationen der In-vitro-Produktion 7
212 Die In-vitro-Kultivierung / verschiedene Kultivierungssysteme 11
2 2 Progesteron 16
221 Die Frühträchtigkeit / Der präimplantatorische Embryo 20
222 Bedeutung von Progesteron für den präimplantatorischen Embryo 23
223 Progesteron in der In-vitro-Produktion 26
2 3 Entwicklungsrelevante Gentranskripte in präimplantatorischen Embryonen 27
231 Insulin-like growth factor 1-Rezeptor (IGF1R) 27
232 Glukosetransporterl (SLC2A1) 29
233 Interferon-T (IFNT2) 31
234 Hydroxy-delta-5-steroid Dehydrogenase (HSD3B1) 32
235 Progesteronrezeptormembrankomponente (PGRMC1 und PGRMC2) 32
2 4 Ziel des Projektes 34
Material und Methoden 35
3 1 In-vitro-Produktion von Embryonen 35
311 Herkunft der Ovarien 35
312 Vorbereitung und Bereitstellung der Kumulus-Oozyten-Komplexe 35
313 In-vitro-Maturation (IVM) 37
314 In-vitro-Fertilisation (IVF) 38
315 In-vitro-Kultivierung (IVC) 39
3 2 Zugabe von Progesteron zur In-vitro-Kultivierung
41
Inhaltsverzeichnis
3 3 Beurteilung der Embryonen 42
3 4 MessengerRNA-Analyse zur Darstellung entwicklungsrelevanter
Gentranskripte 43
341 Isolierung der mRNA 43
342 Reverse Transkription (RT) 44
343 Polymerase Kettenreaktion (PCR) 45
3 5 Untersuchung von Medium auf dessen Progesterongehalt 48
3 6 Allgemeiner Versuchsaufbau 50
361 Produktion boviner Blastozysten und Zugabe von Progesteron zur In-
vitro-Kultivierung 50
362 Darstellung verschiedener entwicklungsrelevanter Gene aus
präimplantatorischen Rinderembryonen 50
3 7 Versuchsanordnung 51
3 8 Statistische Analyse 52
4 Ergebnisse 53
4 1 Progesterongehalt im Kultivierungsmedium 53
4 2 Teilungs- und Entwicklungsraten in vitro produzierter Rinderembryonen mit
und ohne Progesteronzusatz 55
4 3 MessengerRNA-Häufigkeit verschiedener entwicklungsrelevanter
Gentranskripte in bovinen Blastozysten 57
5 Diskussion 59
5 1 Progesterongehalt im Kultivierungsmedium 60
5 2 Teilungs- und Entwicklungsraten in vitro produzierter Rinderembryonen mit
und ohne Progesteronzusatz 62
5 3 MessengerRNA-Expression verschiedener entwicklungsrelevanter
Gentranskripte in bovinen Blastozysten 66
5 4 Schlussfolgerungen 69
Inhaltsverzeichnis
6 Zusammenfassung 70
7 Summary 72
8 Verzeichnisse 74
8 1 Abkürzungsverzeichnis 74
8 2 Abbildungsvefzeichnis 77
8 3 Tabellenverzeichnis 78
8 4 Literaturverzeichnis 80
9 Anhang 95
9 1 Verzeichnis der verwendeten Medien 95
911 Medien für die IVM 95
912 Medien für die IVF 99
913 Medien für die IVC 105
914 Medien für die RT-qPCR 109
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