Die Wirkung von Carbamazepin auf neuronale und epitheliale KCNQ-Kanäle
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Veröffentlicht: |
2011
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EINLEITUNG
............................................................................................................................
1
1.1
AUFBAU
UND
FUNKTION
VON
ZELLMEMBRANEN
..................................................................
1
1.2
LONENTRANSPORT
UND
MEMBRANPOTENZIAL
........................................................................
1
1.3
LONENKANAELE
.......................................................................................................................
4
1.4
KALIUMKANAELE
UND
DAS
AKTIONSPOTENZIAL
......................................................................
4
1.5
FAMILIE
DER
KCNQ-KANAELE
..............................................................................................
6
1.5.1
PHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
VON
KCNQI
UND
AKZESSORISCHEN
KCNE
UNTEREINHEITEN
.....................................................................................................................
8
1.5.2
PHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
VON
NEURONALEN
KCNQ-KANAELEN
..............................
10
1.6
EPILEPSIE
UND
ANDERE
LONENKANALKRANKHEITEN
............................................................
12
1.7
DAS
ANTIEPILEPTIKUM
CARBAMAZEPIN
............................................................................
15
1.8
FRAGESTELLUNG
...................................................................................................................
17
2
MATERIALIEN
UND
METHODEN
...............................................................................................
18
2.1
CHEMIKALIEN
UND
ENZYME
..............................................................................................
18
2.2
PUFFER,
LOESUNGEN
UND
BAKTERIENNAEHRMEDIEN
.............................................................
18
2.3
PLASMID
............................................................................................................................
19
2.4
MIKROBIOLOGISCHE
METHODEN
..........................................................................................
19
2.4.1
HERSTELLUNG
ELEKTROKOMPETENTER
ZELLEN
................................................................
19
2.4.2
TRANSFORMATION
VON
BAKTERIEN
DURCH
ELEKTROPORATION
......................................
20
2.4.3
PRAEPARATION
VON
PLASMID
DNA
.............................................................................
20
2.4.4
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
DURCH
EXTINKTIONSMESSUNG
....................................
20
2.5
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
..................................................................................
21
2.5.1
RESTRIKTIONSVERDAU
..................................................................................................
21
2.5.2
LIGATION
VON
DNA
FRAGMENTEN
.............................................................................
22
2.5.3
IN-VITRO-TRANSKRIPTION
VON
DNA
IN
CRNA
...........................................................
22
2.5.4
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
......................................................................................
23
2.6
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
METHODEN
.................................................................................
23
2.6.1
OOZYTENPRAEPARATION
................................................................................................
24
2.6.2
VORBEREITUNG
UND
SELEKTION
DER
OOZYTEN
.............................................................
25
2.6.3
MIKROINJEKTION
VON
CRNA
......................................................................................
25
2.6.4
DIE
METHODE
DER
ZWEI-ELEKTRODEN-SPANNUNGSKLEMME
......................................
26
2.6.5
MAKROSKOPISCHE
STROEME
.........................................................................................
29
2.7
STATISTIK
UND
DATENAUSWERTUNGEN
................................................................................
30
2.7.1
ERMITTLUNG
DER
APPARENTEN
OFFENWAHRSCHEINLICHKEIT
I/IMAX
...........................
30
3
.
ERGEBNISSE
..........................................................................................................................
31
3.1
WIRKUNG
VON
CARBAMAZEPIN
AUF
KCNQI
KANAELE
UND
AKZESSORISCHE
KCNE
-
UNTEREINHEITEN
.......................................................................................................................
31
3.2
UNTERSUCHUNGEN
DER
NEURONALEN
KCNQ2/KCNQ3
KANAELE
NACH
ZUGABE
VON
CARBAMAZEPIN
........................................................................................................................
35
3.3
WIRKUNG
VON
CARBAMAZEPIN
AUF
HOMOMERE
KCNQ2
UND
KCNQ3
KANAELE
.........
36
3.4
WIRKUNG
VON
CARBAMAZEPIN
AUF
KCNQ5
KANAELE;
VERGLEICH
ZU
CARBAMAZEPIN
10,11-EPOXID
.........................................................................................................................
38
3.5
WIRKUNG
VON
CARBAMAZEPIN
AUF
HETEROMERE
KCNQ5
/
KCNQ3
KANAELE;
VERGLEICH
ZU
CARBAMAZEPIN
10,11-EPOXID
.........................................................................................
43
3.6
WIRKUNG
VON
CARBAMAZEPIN-1
0,11
-EPOXID
AUF
HOMOMERE
KCNQ3
KANAELE
IM
VERGLEICH
ZU
KCNQ5/KCNQ3
UND
KCNQ5
KANAELE
......................................................
..
3.7
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
VON
KOEXPRIMIERTEN
KCNQ5
/KCNE3
KANAELEN
................................................................................................................................
49
3.8
WIRKUNG
VON
CARBAMAZEPIN
AUF
KCNQ5/KCNE3
HETEROMERE;
VERGLEICH
ZU
CARBAMAZEPIN-10,11
-EPOXID
..............................................................................................
51
3.9
VERGLEICH
DER
WIRKUNG
VON
CARBAMAZEPIN-1
0,11
-EPOXID
AUF
KCNQ5,
KCNQ5/KCNE3
UND
KCNQ1/KCNE3
KANAELE
................................................................
54
4
DISKUSSION
...............................................................................................................................
56
4.1
UNTERSUCHUNGEN
VON
KCNQ
KANAELEN
IM
EXPRESSIONSSYSTEM
DER
OOZYTE
............
56
4.2
AKZESSORISCHE
KCNE-UNTEREINHEITEN
STEIGERN
DIE
EMPFINDLICHKEIT
AUF
CBZ
.......
58
4.3
VERGLEICH
DER
WIRKUNG
VON
CBZ
UND
EPX
.................................................................
60
4.4
BEDEUTUNG
DER
CBZ
UND
EPX
WIRKUNG
AUF
NEURONALE
KCNQ
KANAELE
.................
63
5
ZUSAMMENFASSUNG
..................................................................................................................
66
6
LITERATURVERZEICHNIS
..............................................................................................................
68
7
ANHANG
....................................................................................................................................
76
DANKSAGUNG
............................................................................................................................
76
LEBENSLAUF
..............................................................................................................................
77
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