Spezies-spezifischer Nachweis von Chlamydien bei Haustieren mittels Real-Time PCR
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| Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler
2010
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| Ausgabe: | 1. Aufl. |
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| adam_text | ABKUERZUNGEN IV 1 EINLEITUNG 1 2 LITERATURUEBERSICHT 3 2.1 EIGENSCHAFTEN
DER CHLAMYDIALES 3 2.1.1 MORPHOLOGISCHE UND BIOCHEMISCHE EIGENSCHAFTEN 3
2.1.2 ENTWICKLUNGSZYKLUS UND TENAZITAET 3 2.1.3 ANTIGENSTRUKTUREN 5 2.1.4
PERSISTENZ 5 2.2 TAXONOMIE DER CHLAMYDIALES 6 2.3 MEDIZINISCHE BEDEUTUNG
DER CHLAMYDIACEAE 9 2.3.1 VOEGEL 9 2.3.2 SAEUGER 10 2.3.2.1 SCHAFE UND
ZIEGEN 10 2.3.2.2 RINDER 11 2.3.2.3 SCHWEINE 11 2.3.2.4 PFERDE 12
2.3.2.5 KATZEN 12 2.3.2.6 HUNDE 13 2.3.2.7 MEERSCHWEINCHEN UND KLEINE
SAEUGETIERE 13 2.3.2.8 MENSCH 14 2.3.3 SONSTIGE WIRTSSPEZIES 14 2.4
BEDEUTUNG VON CHLAMYDIEN ALS ZOONOSEERREGER 15 2.5 TIERSEUCHENRECHTLICHE
BESTIMMUNGEN IN DEUTSCHLAND 17 2.6 METHODEN ZUM NACHWEIS VON
CHLAMYDIENINFEKTIONEN BEI TIEREN 19 2.6.1 PROBEN FUER DIE
CHLAMYDIENDIAGNOSTIK 19 2.6.2 DIREKTE NACHWEISVERFAHREN 20 2.6.2.1
ZELLKULTUR, FAERBUNG, IMMUNFLUORESZENZ 20 2.6.2.2 ANTIGEN-ELISA 20
2.6.2.3 POLYMERASE-KETTENREAKTION (PCR) 21 2.6.2.4 REAL-TIME PCR 24
2.6.2.5 DNA-MICROARRAY 26 2.6.3 INDIREKTE NACHWEISVERFAHREN 27 2.6.3.1
KOMPTEMENTBINDUNGSREAKTION 27 BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/1004814968 DIGITALISIERT DURCH 4.1.4
REPRODUZTERBARFCEIT 73 2.6.3.2 ANTIKOERPER-ELISA UND IMMUNOBLOT 27 3
MATERIAL UND METHODEN 29 3.1 GERAETE, INSTRUMENTE UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN 29 3.2 HARD- UND SOFTWARE 31 3.3 CHEMIKALIEN UND
NAEHRMEDIEN 31 3.4 BAKTERIENSTAEMME 34 3.5 DNA-PROBEN 35 3.6 PROBEN FUER
DEN RINGVERSUCH 37 3.7 ZELLLINIE 38 3.8 BAKTERIOLOGISCHE METHODEN 39
3.8.1 ANZUCHT UND VERMEHRUNG VON CHLAMYDIEN IN ZELLKULTUREN 39 3.8.2
ANZUCHT UND VERMEHRUNG VON ANDEREN BAKTERIEN 41 3.8.3 BESTIMMUNG DER
CHLAMYDIEN-KEIMZAHL 41 3.9 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 43 3.9.1
GEWINNUNG VON GENOMISCHER DNA 43 3.9.2 DESIGN VON SPEZIES-SPEZIFISCHEN
REAL-TIME PCR-ASSAYS 44 3.9.3 CHLAMYDIACEAE-SPEZIFISCHER REAL-TIME
PCR-ASSAY 49 3.9.4 REAL-TIME PGR-ASSAYS 49 3.9.5 REAL-TIME
PCR-UNTERSUCHUNG VON DNA-PROBEN AUS KLINISCHEM PROBENMATERIAL 52 3.9.6
RINGVERSUCH DER AVID-ARBEITSGRUPPE MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN IN DER
TIERSEUCHENDIAGNOSTIK ZUM NACHWEIS VON CP. PSITTAD
(PSITTAKOSE-RINGVERSUCH) MIT DEM ENTWORFENEN ASSAY 1 54 3.9.7
DNA-MICROARRAY-ASSAY 57 3.9.8 STATISTISCHE AUSWERTUNG 58 4 ERGEBNISSE 59
4.1 EIGENSCHAFTEN DER SPEZIES-SPEZIFISCHEN REAL-TIME PCR-ASSAYS 59 4.1.1
SONDEN- UND PRIMERKONZENTRATION 59 4.1.2 SPEZIFITAET UND SENSITIVITAET 61
4.1.3 NACHWEISGRENZE 63 DANKSAGUNG 160 4.2 NACHWEIS VON CHLAMYDIA UND
CHLAMYDOPHILA SPP. BEI HAUSTIEREN 76 4.2.1 RICHTLINIEN FUER DIE BEFUNDUNG
DER UNTERSUCHUNGSERGEBNISSE 76 4.2.2 UEBERSICHT UEBER DIE ERGEBNISSE IN
DEN VERSCHIEDENEN REAL-TIME PCR-ASSAYS 77 4.2.3 PAPAGEIEN, SITTICHE UND
TAUBEN 81 4.2.4 WIEDERKAEUER 82 4.2.5 SCHWEINE 83 4.2.6 PFERDE 84 4.2.7
HEIMTIERE 84 4.3 VERGLEICH VON REAL-TIME PCR- UND
DNA-MICROARRAY-ERGEBNISSEN 85 4.4 ERGEBNISSE DES PSITTAKOSE-RINGVERSUCHS
87 5 DISKUSSION 93 5.1 METHODIK DER SPEZIES-SPEZIFISCHEN REAL-TIME
PCR-ASSAYS 93 5.2 VERGLEICHENDE UNTERSUCHUNGEN MIT SPEZIES-SPEZIFISCHEN
MICROARRAYS (NRL).98 5.3 PSITTAKOSE-RINGVERSUCH 100 5.4 VERBREITUNG VON
CHLAMYDIA UND CHLAMYDOPHILA SPP. BEI HAUSTIEREN 102 5.5
SCHLUSSFOLGERUNGEN 107 6 ZUSAMMENFASSUNG 109 SUMMARY 111 7
LITERATURVERZEICHNIS 113 ANHANG 143
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