Implantation von de-differenzierten Monozyten aus der Rattenmilz als pluripotente Stammzellen im zentralen Nervensystem der Ratte
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adam_text | Titel: Implantation von de-differenzierten Monozyten aus der Rattenmilz als pluripotente Stammzellen im zen
Autor: Rajabi, Atefeh
Jahr: 2008
Inhaltsverzeichnis
Seite
1 Einleitung 1
1.1 Embryonale Stammzellen 1
1.1.1 Postembryonale Stammzellen 2
1.1.2 Adulte Stammzellen 4
1.2 Zellersatz und Transdifferenzierung 4
1.3 Der Hippocampus 6
1.3.1 Anatomie 7
1.3.2 Cytoarchitektur 8
1.3.3 Verbindungen 10
1.3.4 Funktionelle Aspekte 10
1.3.5 Neurogenese im Hippocampus 11
1.4 Gliazellen / Astrozyten 14
2 Fragestellung 15
3 Methodik und Materialien 16
3.1 Versuchstiere 16
3.2 Stammzellen 16
3.3 BrdU 17
3.4. Implantation 18
3.5 Vorbereitung für immunhistochemische Färbung 21
3.5.1 Perfusion 21
3.5.2 Einfrieren 21
3.5.3 Schneiden am Kryostat 22
3.6 Prinzip der immunhistochemischen Färbung 22
3.6.1 Direkte Methode 23
3.6.2 Indirekte Methode 23
3.6.3 Peroxidase 24
3.7 Durchführung der immunhistochemischen Färbung 25
3.7.1 Citrat Puffer Methode 25
3.7.2 Antikörperfärbung 25
3.7.3 Glial fibrillary acid protein (GFAP)- Protokoll 25
3.7.4 BrdU- Protokoll 26
3.7.5 BrdU + Vectastain- Protokoll 26
3.7.6 DAPI- Protokoll 27
3.7.7 DAPI- Vectashield- Protokoll 27
3.7.8 Doublecortin (DCX)- Protokoll 27
3.7.9 3,3-Diaminobenzidin (DAß)- Protokoll 28
3.7.10 Peroxidase 28
3.8 Kodierung der Schnitte 29
3.9 Lösungen 30
3.10 Antikörper 31
4 Ergebnisse 32
4.1 Negativkontrolle 32
4.2 C-Tier 33
4.3 Methodik-Kontrolle 35
4.4 Q-Tier 36
4.5 Integration implantierter Stammzellen 38
4.6 DAPI 38
4.7 Glial Marker GFAP 41
4.8 Doublecortin (DCX) 44
4.9 Wanderung über das Corpus callosum 44
4.10 DAß (3,3 -Diaminobenzidin) / Peroxidase 47
4.11 ICV-Tier 50
5 Diskussion 51
5.1 Monozyten als pluripotente Stammzellen 51
5.2 Integration 54
5.3 Neurogenese 55
5.4 Differenzierung 57
5.5 Wissenschaftliche Zukunftsaussichten 61
6 Zusammenfassung 62
7 Literatur 64
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