Quantifizierung der Fibronektin-mRNA-Expression in Plattenepithelkarzinomen des oberen Aerodigestivtraktes und adenoiden Vegetationen
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2004
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ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
2 MATERIAL UND METHODEN 4
2.1 Zellkulturen 4
2.1.1 Primäre Kultur von oralen epithelialen Zellen 4
2.1.2 Kultur von etablierten Tumorzellinien 5
2.1.3 Subkultivierung der Zellen 6
2.2 Gewinnung von nativen Gewebsproben 7
2.3 Isolierung von Gesamt-RNA 9
2.4 Photometrische Konzentrationsbestimmung der RNA 10
2.5 Analyse der RNA-Qualität durch Agarose-Gelelektrophorese 11
2.6 cDNA-RNA Hybridisierung 12
2.6.1 Markierungsreaktion 12
2.6.2 Northern Hybridisierung 12
2.63 Detektion 13
2.6.4 Densitometrische Analyse der Fluorogramme 13
2.7 Isolierung der Proteine 14
2.8 Photometrische Bestimmung der Proteinkonzentration 15
2.9 Konzentrationsbestimmung von Fibronektin mittels ELISA 15
2.10 Statistische Auswertung 16
3 ERGEBNISSE 17
3.1 Fibronektin-mRNA-Expression in Schleimhaut und Plattenepithelkarzinomen 17
3.2 Fibronektin-mRNA-Expression in Tumorzellinien 20
3.3 Fibronektin-mRNA-Expression in Adenoiden Vegetationen 22
3.4 Ergebnisse der ELISA 23
4 DISKUSSION 26
4.1 Probengewinnung und -Verarbeitung 26
4.2 Physiologische Funktion der Extrazellulärmatrix und des Extrazellulär¬
proteins Fibronektin 28
4.3 Fibronektin und Fibronektin-mRNA-Expression in Tumoren 29
4.4 Fibronektin in lymphatischen Geweben 34
4.5 Vergleich von Karzinomen und adenoiden Vegetationen 34
4.6 Ausblick und Therapieansätze 35
5 ZUSAMMENFASSUNG 37
6 LITERATURVERZEICHNIS 39
7 DANKSAGUNG 48
8 CURRICULUM VITAE 49
|
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INHALTSVERZEICHNIS Seite
ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
2 MATERIAL UND METHODEN 4
2.1 Zellkulturen 4
2.1.1 Primäre Kultur von oralen epithelialen Zellen 4
2.1.2 Kultur von etablierten Tumorzellinien 5
2.1.3 Subkultivierung der Zellen 6
2.2 Gewinnung von nativen Gewebsproben 7
2.3 Isolierung von Gesamt-RNA 9
2.4 Photometrische Konzentrationsbestimmung der RNA 10
2.5 Analyse der RNA-Qualität durch Agarose-Gelelektrophorese 11
2.6 cDNA-RNA Hybridisierung 12
2.6.1 Markierungsreaktion 12
2.6.2 Northern Hybridisierung 12
2.63 Detektion 13
2.6.4 Densitometrische Analyse der Fluorogramme 13
2.7 Isolierung der Proteine 14
2.8 Photometrische Bestimmung der Proteinkonzentration 15
2.9 Konzentrationsbestimmung von Fibronektin mittels ELISA 15
2.10 Statistische Auswertung 16
3 ERGEBNISSE 17
3.1 Fibronektin-mRNA-Expression in Schleimhaut und Plattenepithelkarzinomen 17
3.2 Fibronektin-mRNA-Expression in Tumorzellinien 20
3.3 Fibronektin-mRNA-Expression in Adenoiden Vegetationen 22
3.4 Ergebnisse der ELISA 23
4 DISKUSSION 26
4.1 Probengewinnung und -Verarbeitung 26
4.2 Physiologische Funktion der Extrazellulärmatrix und des Extrazellulär¬
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4.3 Fibronektin und Fibronektin-mRNA-Expression in Tumoren 29
4.4 Fibronektin in lymphatischen Geweben 34
4.5 Vergleich von Karzinomen und adenoiden Vegetationen 34
4.6 Ausblick und Therapieansätze 35
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