Molekulargenetischer Nachweis von Chlamydia pneumoniae aus peripherem Blut bei Patienten mit koronarer Herzkrankheit nach Stentimplantation Assoziation mit Restenose und antibakterieller Therapie
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1 Einleitung 5
1.1 Die koronare Herzkrankheit 5
1.1.1 Definition, Epidemiologie und Ätiologie 5
1.1.2 Anatomie und Pathophysiologie 6
1.1.3 Klinik und Diagnostik 10
1.1.4 Therapie und Verlauf. 11
1.2 Chlamydia pneumoniae (C. pneumoniae) 12
1.2.1 Beschreibung, Klinik und Therapie 12
1.2.2 C. pneumoniae und KHK 12
1.3 Fragestellung 16
2 Patienten, Material und Methoden 18
2.1 Patientenrekrutierung im Rahmen der APRES-Studie 18
2.1.1 Ein- und Ausschlusskriterien 18
2.1.2 Katheterintervention und Stentimplantation 19
2.1.3 Randomisierung 19
2.1.4 Postinterventionelle Behandlung 20
2.1.5 Definitionen und Zielgrößen 20
2.1.6 Analyse und Ethik 21
2.2 Material 22
2.2.1 Verbrauchsmaterial, Chemikalien und Medien 22
2.2.2 Reaktionskits und Enzyme 24
2.2.3 Nukleinsäuren und-Molekulargewichtsstandards 24
2.2.4 Primer 24
2.2.5 Pufferlösungen 27
2.2.6 Geräte und Software 27
2.3 Methoden 29
2.3.1 Probenaufarbeitung und DNA-Extraktion 29
2.3.2 Polymerase-Kettenreaktion und Elektrophorese 30
2.3.3 Sequenzierung 34
3
3 Ergebnisse 37
3.1 Mehrstufige DNA-Extraktion 37
3.1.1 Amplifikation von DNA 40
3.2 Primerdesign und PCR-Bedingungen 42
3.2.1 Primerdesign 42
3.2.2 Optimierung der PCR-Bedingungen 45
3.3 Optimierung der Sequenzierung 47
3.3.1 Sequenzierung der PCR-Produkte 48
3.4 Patientenscreening 49
3.4.1 Molekulargenetischer Nachweis von C. pneumoniae 49
3.5 Statistische Auswertung der experimentellen Ergebnisse 51
3.5.1 Prävalenz einer C. pneumoniae-Infektion 51
3.52 Infektion und ereignisfreie Gefäßoffenheitsrate nach Koronarstenting 52
3.53 Infektion und Gefäßoffenheitsrate ohne antibiotische Behandlung 54
3.5.4 Einfluß der Behandlungsgruppe auf die Restenoserate 56
3.5.5 Einfluß der Behandlung bei Nachweis einer Infektion 58
3.5.6 Einfluß der Behandlung auf die Infektion mit C. pneumoniae 60
4 Diskussion 62
4.1 Die PCR als diagnostisches Verfahren zum Nachweis von C. pneumoniae 62
4.2 Direktnachweis von C. pneumoniae und Restenose nach Koronarstenting 65
4.3 Antibiotika zur Prävention kardialer Ereignisse bei Patienten mit KHK 67
4.4 Schlußfolgerungen und Ausblick 70
5 Zusammenfassung 72
6 Abkürzungsverzeichnis 74
7 Lebenslauf 76
8 Widmung 78
9 Danksagung 78
10 Erklärung 78
11 Literaturverzeichnis 79
4
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