Verhalten von modifizierten Asbeststäuben in unterschiedlichen zelltoxikologischen Tests

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Bibliographische Detailangaben
1. Verfasser: Chauvet, Dominique (VerfasserIn)
Format: Abschlussarbeit Buch
Sprache:German
Veröffentlicht: Gießen Fachverl. Köhler 2001
Schriftenreihe:Veterinärmedizin
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adam_text Inhaltsverzeichnis I. Einleitung 1 II Literaturübersicht 2 1 Stoffbeschreibung 2 1.1 Vorkommen, Aufbau und Zusammensetzung von Asbest 2 1.2 Chemische Eigenschaften und Oberflächenbeschaffenheit 3 1.3 Bioresistenz und biologische Verfügbarkeit 3 1.4 Fasergröße und Fasercharakterisierung 5 1.5 Gesundheitsgefährdung durch Asbest 6 1.5.1 Asbestose 6 1.5.2 Mesotheliom 6 1.5.3 Lungenkarzinom 7 2 Toxizitätsmechanismen des Asbests 8 2.1 Zytotoxizität 8 2.2 Fibrogene Wirkung 8 2.3 Mutagene Wirkung und Kanzerogenität 9 3 Oberflächenbehandlung von Asbest 10 3.1 Säurebehandlung 11 3.2 PoIyvinylpyridin-N-oxid(P204) 12 3.3 Surfactant 13 3.4 Leenhin 14 3.5 Andere oberflächenaktive Substanzen 15 4 Tierexperimentelle Untersuchungen 16 5 Zellexperimentelle Untersuchungen 17 5.1 Erythrozyten 17 5.2 Makrophagen 18 5.3 Zellinien 20 6 Reaktive Sauerstoffspezies (ROS) 21 7 Chemilumineszenz 24 III Eigene Untersuchungen 25 A Material und Methoden 25 1 Zellkultivierung 25 1.1 Lungenspülung 25 II. I Spendertiere 25 1.1.2 Präparation der Tiere 26 1.1.3 Spülsysteme 27 1.1.4 Spülflüssigkeit 27 1.1.5 Spülvorgang ¦ 29 1.2 Waschen und Zählen der Zellen , 30 1.3 Zellkultur 31 1.3.1 Zellkulturmedium 31 1.3.2 Einsaat und Anwachsen der Zellen 32 1.3.3 Expositionsmedium 33 1.3.4 Exposition der Zellen 38 1.3.5 Inkubationszeit 39 2 Enzymatische Bestimmung der Lactatdehydrogenase 40 2.1 Testprinzip 40 2.2 Ansatz der Reagenzien 40 2.3 Abnahme und Aufbereitung der Proben 40 2.4 Messung der Lactatdehydrogenase 41 2.5 Auswertung 41 3 Enzymatische Bestimmung des Adenosintriphosphats 43 3.1 Testprinzip 43 3.2 Meßgerät : 43 3.3 Ansatz der ATP-Reagenz 43 3.4 Abnahme und Aufbereitung der Proben 44 3.5 Messung des Adenosintriphosphats 45 3.6 Auswertung 45 4 Chemilumineszenzmessung : 46 4.1 Prinzip 46 4.2 CL-lndikatoren 46 4.2.1 7-Dimethylamino-naphtalin-l,2-dicarbonsäure-hydrazid (DMNH) 46 4.2.2 Lucigenin 47 4.3 Zymosan 47 4.3.1 Zymosan-Ansatz 47 4.3.2 Zymosan-Gebrauchslösung 48 4.4 Chemilumineszenz-Meßgerät 48 4.5 Chemilumineszenz-Meßvorgang 49 4.5.1 Sekundäre Chemilumineszenz 49 4.5.2 Primäre Chemilumineszenz 50 4.6 Auswertung 50 B Ergebnisse der eigenen Untersuchungen 52 1 Lactatdehydrogenase-Freisetzung 52 1.1 Meerschweinchen-Alveolarmakrophagen 52 1.1.1 Einfluß der Staubkonzentration auf die LDH-Freisetzung 52 1.1.2 Einfluß von Surfactant in der Konzentration 20,84 Mg/ml auf die LDH- Freisetzung 56 1.1.3 Einfluß verschiedener Surfactantkonzentrationen auf die LDH-Freisetzung 62 1.2 Ratten-Alveolarmakrophagen 66 1.2.1 Einfluß der Staubkonzentration auf die LDH-Freisetzung 66 1.2.2. Einfluß von Surfactant in der Konzentration 20,84 ug/ml auf die LDH- Freisetzung 68 2 Intrazellulärer ATP-Gehalt 72 2.1 Meerschweinchen-Alveolarmakrophagen 72 2.1.1 Einfluß der Staubkonzentration auf den intrazellulären ATP-Gehalt 72 2.1.2. Einfluß von Surfactant in der Konzentration 20,84 ug/ml auf den intrazellulären ATP-Gehalt 76 2.1.3 Einfluß verschiedener Surfactantkonzentrationen auf den intrazellulären ATP-Gehalt 82 2.2. Ratten-Alveolarmakrophagen 86 2.2.1 Einfluß der Staubkonzentration auf den intrazellulären ATP-Gehalt 86 2.2.2 Einfluß von Surfactant in der Konzentration 20,84 ug/ml auf den intrazellulären ATP-Gehalt 88 3 Sekundäre Chemilumineszenz 92 3.1 Meerschweinchen-Alveolarmakrophagen 92 3 1.1 Einfluß der Staubkonzentration auf die sekundäre CL-Aktivität 92 3.2 Ratten-Alveolarmakrophagen 96 3.2.1 Einfluß der Staubkonzentration auf die sekundäre CL-Aktivität 96 3.2.2 Einfluß verschiedener Surfactantkonzentrationen auf die sekundäre CL-Aktivität 98 4 Primäre Chemilumineszenz 100 4.1 Meerschweinchen-Alveolarmakrophagen 100 4.1.1 Einfluß der Staubkonzentration auf die primäre CL-Aktivität 100 4.1.2. Einfluß der Surfactantkonzentration auf die primäre CL-Aktivität 106 4.2 Ratten-Alveolarmakrophagen 108 4.2.2. Einfluß der Surfactantkonzentration auf die primäre CL-Aktivität 108 A IV Diskussion 110 1 Methoden 110 1.1 Vergleich der Parameter LDH, ATP und Sekundare CL 110 1.2 Primäre Chemilumineszenz 111 2 Wirkung unterschiedlicher Staubarten 112 2.1 Zytotoxizität verschiedener Staubarten 112 2.2 Primäre Chemilumineszenz verschiedener Staubarten 112 3 Dosisabhängigkeit 113 4 Einfluß der Oberflächenbehandlung 114 4.1 Einfluß der Oberflächenbehandlung auf die Zytotoxizität 115 4.2 Einfluß der Oberflächenbehandlung auf die Sauerstoffradikalbildung 117 5 SurfactanteinfluB 119 6 Tierartspezifische Unterschiede 120 V Zusammenfassung 122 VI Summary 124 VII AbkUrzunesverzeichnis 125 VIII Literaturverzeichnis 126
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