Antibiotica aus Actinomyceten Leitfaden für die Isolierung und Charakterisierung
Gespeichert in:
| Format: | Buch |
|---|---|
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Jena
Fischer
1963
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Leitfaden für die Isolierung und Charakterisierung
Bearbeitet on
t
YSevcik
un te r Mi ta rbe i t von
I M ä lek,VMusileknndZReh ä c e k
Institut für Mikrobiologie der Tschechoslowakischen
i Akademie der Wissens« haften Prag
)
Mit 16 Abbildungen und 8:1 TabelleJi im Text sowie • Tafeln
YEBGUSTAVFISCHERVERLAGJENA
Inhaltsverzeichnis
Vorwort V
Kap I Biologie antibiotisch aktivi r Act inomj oeteii 1
Isolierung der Actinomj ceten I
Isolierungsprinzip für Mikroorganisu ien durch Zentrifugieren _
Prüfung der theoretischen Ergebnit se 3
Ökonomische Auswertung der Zent) -fugiermethode - ij
Standard-Zentrifugiermethode fiir 1 ie Isolierung von Actinomyceteri 7
Weitere Methoden zur Entfernung v nm it Aktinomyceten auftretenden
Begleitmikroben S
Selektion antibiotisch akt iver Actinomyceten !)
Ubergußteste 14
Ivap II Feststellung der Wirkungssjiektrcn der Antibiotica lt
Bestimmung des ersten antimikrobiellei • Spektrums von Actinomyceten 1»
Nährböden für die zu testenden Aci inomyccten 17
Herstellen von Agarblöcken mit A tinomycetenkolonien
Herstellen der Testplatten und Fesi stellen des antim ikrobiellen Spek-
I trums 2ll
Hemmzonen und ihre Auswertung 2o
Bestimmung des antimikrobiellen Spektrums bei verschiedenen pH-
Werten 12:s
Herstellung von Testplatten mit pH-Gradient 2 !
Der Einfluß des pH-Wertes auf (• estalt u ncl Größe der Hemmzonen 2-7
Bestimmung der antimikrobiellen Wirksamkeit auf Agarnährböden 27
Bestimmung der antibakteriellen Wirksamkeit in flüssigen Nährböden 31
Bestimmung der baktericiden Wirksamkeit 3i
Bestimmung der bakterioiytisehen Wirksamkeit 32
Bestimmung der fungiciden Wirksamkeit 32
Bestimmung der Antiphagenwirksamkoit 3:!
Prüfung der antiviralen und antiricket i sialen Wirksamkeit am Hühner
embryo 33
Schutztest 3- !
Kontakttest 3 t
Bestimmung der Toxizität an Hühn irembryonen 3 7
Prüfung der antiviralen und antirickett tialen Wirksamkeit an Tieren 3
Diffusionsmethode 3r
Teste an Meerschweinchen 3 i
Vorbereitung von Antibiotica-Präparaten für den Antivirus-Test 30
Testen von Antibiotica mit cytostal scher Wirksamkeit 37
In-vivo-Test mit dem EHRLICH-Ascifces-Careinom der weißen Maus 3!
Platten-Test mit Zellen des EHRLICH I- Ascites-Carcinoms4
X:1 Inhaltsverzeichnis
Kap III Antibiotica-Wert Ii estimm im gcn 44
Mikrobiologische Bestimmungsmethod• m 44
Diffusionsmethoden 44
Verdünnungsmethoden 47
Turbidimetrische Methoden 17
Weitere Methoden 47
Bestimmungen mit Bakterien als Tcsi keim 4S
Diffusionsmethode zur Bestimmun; des Streptomycins 48
Diffusionsmethode zur Bestimmun ; des Chlortetracyclins 1
Bestimmung weiterei Antibiotica t ach der Diffusionsmethode ~ 4
Bestimmung der Antibiotica nach der Verdünnungsmethode 4
Turbidimetrische Bestimmungen c1 ;r Antibiotica 5
Bestimmungen mit Mykobakterien al,- Testkeim ~ ~
Bestimmungen nach der Diffusion imethode mit Mycobacterium tuber-
culosis als Testkeim - 7
Bestimmung des Viomycins nach der Diffusionsmethode mit Myco-
^ bacterium butyricum als Testkcim ~ S
Bestimmungen mit Mycobacterium p/t/ei als Testkeim ~ 8
Bestimmungen mit Pilzen als Testkc m 9
Bestimmung mit PaiidUium rest-i ictuin als Testkeim 9
Bestimmung antifungaler Antibio ica vom Polyentyp 0
Turbidimetrische Methode zur Bestimmung niedriger Trichomycin-
konzontrationen 02
Weitere Bestimmungen mit Hefci als Testkeim 03
Besondere Bestimmungsmethoden 04
Schnellbestimmungsmethode 04
Bestimmung schlecht diffundieret- 1er Antibiotica 05
Bestimmung wasserunlöslicher Antibiotica 06
physikalisch-chemische Bestimmung!: i der Antibiotica 07
Kap IV Jermciftation der Antibiot ; a 71
Kulturmethoden 71
Kulturmedien 73
Kap V Isolierung undRe in ig ungdrAntibiotica82
„ Adsorption an Aktivkohle -83
Adsorption an Ionenaustauschern -85
Extraktion mittels organischer Lösui gsniittel 85
Reinigung der Antibiot ica durch Gej snstroniverteilnng 87
Gegenstromverteilung der Actinoayeine 89
Gegenstromverteilung der Antibio ica, die sich nicht m wasserunmisch-
baren organischen Lösungsmitteln lösen 89
Chromatographische Reinigung der ntibiotiea 91
Fällung der Antibiotica f*2
Reinigung der Antibiotica durch Sul limation oder Destillation 93
Kap VI Feststellung chemische]- indp Ii ysikaJis c- h-chcmi-
seherEigenschaftenderAitibiotica95
Bestimmung der Löslichkeit der Anti jiotica durch Papierchromatographie 95
i Bestimmung der Löslichkeit der Antibiotica durch Extraktion 101
Inhaltsverzeichnis XI
Prüfung der Permeabilitä t der Antibio ica durch Dialysiemiembrancn auf
Agarplatten l(i:;
Orientierende Bestimmung des Ionei Charakters der Antibiotica durch
Plattentestc 10(1
Orientierende Bestimmung des loneiviharaktrrs der Antibiotica durch
Papier-Elektrophorese 10!)
Inaktivierung der Antibiotica III
Inaktivierung der Antibiotica durch Blutserum 1)2
Bestimmung der Inaktivierung der Antibiotica mit Hilfe von Platten
tosten 1)2
Hemimvirkung der Zucker und org mischen Säuren auf Antibiotica 110
Einfluß von Salzen auf die Wirkm g der Antibiotica lj(i
Einfluß des pH-Wertes auf die An ibioticumwirkung 110
Einfluß der Carbonylgruppen-Reag ntien auf die Wirkung der Anti
biotica 117
Einfluß des Cystc-ins auf die Wirki ng der Antibiotica 117
TryptischerAbb au der Antibiotica 117
Bestimmung der Stabilität der Aniibi« tica US
Verwendung der Papierch romatograph i zur Identifizierung unbekannter
Antibiotica U i
Nachweis der Antibiotica-Flecken ,uf dem Chromatogramm li fi
Adsorptions-Papierch i omatograph i 122
Ionenaustauseh-Papierchiomatogra hie 122
Verteilungs-Papierchmmatographie 123
Papierchromatographie wasserunlö; lieber Antibiotica 127 •
A rerteilungs-P »piei Chromatographie mit Ant ibiotica-Trägern ]2-
Eällungs-Papierch romatograph ie 12 )
Aussalzende Papierchiomatographi 130
Einfluß von Salzen auf die Wanderung der Antibiotica und die Bildung
j von Doppel-Flecken 131
Einfluß der Konzentration eines An ibioticums auf seine Wanderungs
geschwindigkeit 131
Zusammengefaßte Chiomatogramm 13 )
Spezifische chemische Nachwcisrcaktioi en zur Charakterisierung der Anti
biotica 130
Ninhydrin-Reaktion 137
Fomr-Reaktion 137
Biuret-Reaktion 137
Färbung von Eiweißverbindungen a nf Papirrchromatogrammen 13v
PAULY-Reaktion 13S
HopKiis*s-CoLE-R,eaktion 13 »
,EHRlJCH-Reaktion 13!)
SAKAOtrciii-Rcaktion 14
Nachweis von Guanidino-Gruppen ait Diaoetyl-Reag«ms 140
ELSON-MOKCAN-Reakl ion auf Amin «ucker • 14 1
Maltol-Reaktion 142
MoLlSCH-Reaktion : 142
Nachweis von Kohlenhydraten mittels Naphtlioresorcin-Reagens 14 2
Nachweis reduzierender Stoffe mi: ammoniakalischer Silbernitrat-
lösung 143
FEHLiKG-Reaktion 143
ToLLENS-Rcaktion % 14-1
SoHiFF-Reaktion ^ 14-1
XII Inhaltsverzei jlmis
B enedict-Reaktion 1 4 5
Reaktion mit 2, 4-Dinitrophenylliydrazin 145
PüKTH-HBBBStiUfN-Reaktion 146
LiEBEratA jfN-Reakt ion 146
MiLLON-Reaktion 147
Reaktion mit FeCl , , 147
Oxydation mittels Perjodsäure 148
Reaktion mit Kaliumpermanganat (BAEYEK-Probe) 148
Bromieren 149
Bestimmung weiterer physikalisch• chemischer Eigenschaften der Anti
biotica 1 50
Kap VII Bestimmung der T oxizitäl neuer Antibiotica 1 53
Bestimmung der Toxizität der Antibiotica an Protozoen 154
i
Kap VIII Identifizierung neuer Aniibi o tica 1 58
Arbeitsvorgang beim Suchen und identifizieren neuer Antibiotica • 158
Verwendung resistent, gezüchteter Mikroorganismen zur Identifizierung
von Antibiotica 162
Testmikroorganismen 162
Nährböden für die Testorganisi1 • en 163
Resistcnzzüchtung von Mikroorganismen gegen Antibiotica 164
Herstellung der Grundlösungen der Antibiotica 165
Herstellung der Gradienten-Piaifcen 165
Technik der Adaptation , 166
Kultivierung und Erhaltung gefestigter Stämme 167
, Testung unbekannter Antibiotica mit resistenten Stämmen 168
Anwendungsgrenzen der Methode 173
Andere Methoden mikrobiologiscJ er Bestimmung unbekannter Anti-
biotica 175
Problematik der Antibiotica-Identiiizierung mit Hilfe der Kreuzantibiose
der Actinomyceten 178
Kap IX Schlüssel zur P estimm« n» der Antibiotica aus
Actinomyceten182
1 Gruppe: Antibiotica löslich in V asser, unlöslich in Äther und Butanol,
wirksam gegen Bakterien, gegeberenfalls auch gegen andere Mikroorga
nismen 182
2 Gruppe: Antibiotica, löslich in Äther oder Butanol, die auf Bakterien
und eventuell auch auf andere Mikroorganismen einwirken 186
3 Gruppe: Antibiotica mit sehr engem Wirkungsspektrum 198
4 Gruppe: Antibiotica, gegen Pilz -, eventuell auch gegen andere Mikro
organismen wirksam 199
, 5 Gruppe: Antibiotica, die gegen Viren, Rickettsien oder Bakteriophagen
wirken 205
6 Gruppe: Antibiotica, die auf Tumoren einwirken 207
Kap X Besehreibung der einzelnen Antibiotica 211
Gruppe der Strcptothricine und X jomycine 211
, Streptothricin S 214 — Streptothricin VI S 219 — Antibioticum EI5
S 219 - Neomycin S 220 (Iseomycin A S 221, Neamin S 221) -
Antibioticum H-107 und H-277 (Roseothriein) S 225 — Catenulin
Inhaltsverzeichnis XIII
S 227 — Pleocidin S 228 — Kanamy ;m S 230 - Mycothriein S 232 —
Antibioticum 4279 S 232 — Grasserii •myein S 233 — Grisin (Grisemin)
• S 233 - Speciomycin S 234
Antibiotica basischen Charakters, löslich in Wasser , 234
Actinorubin S 234 — Lavendulin S :!35 — Netropsin S 237 — Streptin
- S 239 — Eulicin S 239 — Violacetin S 240 - Allomycin S 241 — Albo-
verticillin S 241 — Antibioticum EI 185 S 242 — Framycetin S 243 —
Antibioticum 1943 S 243
Streptomycine : 241!
Antibiotica mit Peptidcharakter 252
Grisein S 253 — Albomycin S 257 Alazopeptin S 258 — Streptolin
S 259 — Antibioticum 136 S 263 — Viomvcin S 265 - Phthiomycin
S 269 — Vinactin S 270 — Evericin S 271 — Geomyem S 272 — Phleo-
myein S 273 - Actinoidin S 274 - Paromomycin S 275 - Cinnamycin ,
S 275 — Amphomyein S 277 - Z omycin S 278 - Kristallomycin
S 279 — Echinomycin S 280 — Amidi myein S 281 — Etamycin S 283 —
Bryamycin S 284 — Duramycin S 85 — Telomycin S 285 — Thiaetin ,
S 286 — Th iostrepton S 287 — Am ibioticum X-100S S 288 — Acti-
duine S 288 — Yalinomycin S 289
Antibiotisch wirksame Aminosäure -Der • vat-c 290
Azaserin S 290— Cycloserin (Oxamycin) S 292 — O-Carbamyl-D-Serin
S 293 - 6-Diazo-5-oxo-L-Norleucm (DON) S 294
Hochmolekulare Antibiotica 29~
Micromonosporin S 296 — Antibioticum BU 271 S 297--Actinomycetin
S 298 — Antibioticum BU 306 S 00 — Aiitibioticmn 2377 S 302 —
Thermomycin S 303 — Actinoxantli n S 304 - Melanomycin S 305 -
Carcinocidin S 305
Chinon-Antibiotica 30 i
Aetinomycine S 307 - Levomycin S 316 — Actinochrysin S 317 —
Rhodomyein S 317 — Rliodomycetm S 320 - Actinorhodin S 323 —
Rubidin S 324 — Granaticin S 325 • Cyanomycin S 325 — Litmocidin
S 326 —Noeardorubin S 327 — Vinai et-in S 328 —Chinocycline S 329 —
Ractinomvcin S 331 — Pluramycin S 332 - Streptovaricin S 333 —
Heliomycin S 334 — Antibiotica N-10!) S 335 — Flaveolin S 337 —
Camphomycin S 339
Gruppe der roten und violetten Pigmt ite 330
Rhodocidin S 340 — Mitomycin S 3 11 — Antivirubin S 342 — Mycetin
S 343
Antibiotica der Phenolgruppc 34M
Chartreusin S 343 - Actinoleucin : I 345
Gruppe der Tetracycline 34Ii
Chlortetracyclin S 340 — Oxytetracyclin S 348 — Tetracyclin S 349
Gruppe der Macrolidc 350
Proactinomycin S 350 — Pikromyc n S 351 - Methymycin S 354 -
Griseomycin S 356 — Celesticetin S 357 - Lcucomytin S 358 — Leuco-
myein B S 360 — Tertiomycin A o 301 — Tcrtiomycin B S 362 —
Antibioticum 446 S 362 — Foromaci lin S 363 — Oleandomycin S 365 —
Miamyein S 366 — Grisamin S 36 — Eryl hromycin S 368 — Carbo- (
myein S 371 - Albomycetin S 37 )
Antibiotica aus der Gruppe der Gluco^idc 37
Novobiocin S - 375 — Antibioticum 747 S 378 - l isiöcetin S 378 -
Vancomycin S 379
XIV Inhal tsverzeic hnis
Antibiotica aus der Gruppe der Lacfone, !80
Aeetomycin S 380 Antibioticum PA 147 S 381 - Antibioticum
PA 132 S 382
Gruppe der schwefelhaltigen Antibioi ica 3S3
Thiolutin S 383 — Aurcothricin S 385 — Heyden-Antibioticum 9
(HA-9) S 387 — Thioaurin S 389 - Holomycin S 391 — Bottromycin
S 391 — Althiomycin S 393— Griseoviridin S 394 — Thiomycin S 394 —
Sulfocidin S 395
Gruppe der chlorhaltigen Antibiotica 396
Exfoliatin S 396 — Chlorampheniool 8 397
Nukleotid-Antibiotiea 398
Puromycin S 398 — Amicetin S 1-01 — Bamieetin S 403 — Plicacetin
S 404 - Nucleocidin S 405 - Ca rcinophilin S 406
Gruppe der antifungalen Antibiotica 407
Cerevioccidin S 408 — Flavensomycin S 408 — Blasticidin S 409 —
Eumycetin S 410 — Seligocidin 3 411 — Moldin S 412 — Actidion
v (Cycloheximid) S 413 — Fermicidin S 415 — Oligomycin S 416 —
- Blastmycin S 417 - Antimycin S 418 - Vengicid S 421 - Mycolutein
S 421 — Fradicin S 422 — Helixin S 424 - Rotavcntin S 426 — Phaeo-
facin S 427 — Hygroscopin S 438 — Myceriti S 429 — Flavofungin
S 429 - AlomycinS 429
Gruppe der Polyen-Antibiotica 429
Fungicidin (Nystatin) S 430 — Amphotericin S 432 - Antibioticum
PA-166 S 434 - Pimaricin S 434 - Rimocidin S 435 - Chromin
S 436 — Antibioticum PA-86 S 1:37 — Sistomycosiu S 438 — Proto-
cidin S 439 — Etruscomycin S 44 i — Antimycoin A 8 440 — Eurocidin
S 440 - Fungiehroinin und Fungicliromatin S 441 - Filipin S 442 —
Pentamycin S 443-Antibioticum PA-153 S 444 — Mediocidin S 444 —
f Trichomycin S 445 - Ascosin S 147 — C andicidin 3 449 — Candidin
_ S 451 — Antibioticum PA-150 - 453 — Antibioticum 616 S 453 —
Antibioticum AYF S 454 — Ayfactin S 455 - Antibiotica 1033 und
1038 S 455 — Antibioticum 1968 3 455 — Antibioticum A 246 S 456
Antibiotica-Gruppe mit sehr engem AVirkungssprektrum 456
Sarcidin S 457 — Megacillin S 4 57 - Angustmyein S 458 — Acti-
thiazinsäure S 460 - Nocardamin S 463 - Elaiomycin S 464- Pyrido-
myein S 466 — Longisporin S 4 57 - Antibioticum PA-95 S 467 -
Tubermycine S 468 — Antiphli i-Faktor S 469 Antismegmatis-
Faktor S 470 - Nocardin S 470
Antibiotica der Gruppe 2 A 470
Äureolsäure S 471 - Aburamyciu S 472 — Antibioticum LA 7017 -
1 S 473 — Streptolydigin S 473 - Thermoviridin S 474 — Staphylo-
myein S 475 - Resistomycin S 476 - Antibiotica X-206, X-464,
X-537 A S 477 - Phalamycin S 478 — Sulfactin S 479 — Strepto-
gramin S 480 - Chrysomycin S 481 — Antibioticum E 129 S 482 -
Antibioticum D 52 S 482 - Meseuterin S 483 - Nitrosporin S 484 -
Antibioticum D-13 S 485 — Gancidin S 486 — Fuscomycin S 487 —
Nocardianin S 487 - Pulvomycin S 488 - Collinomycin S 489 - Pri-
myein S 490 - Antibioticum Wl; 3/17 S 491 — Mikrosin S 491
Antibiotica der Gruppe 2 B 491
Ruticin S 491 -• Griseolutein S 493 — Hygromycin S 495 — Synergistine
(Antibiotica PA-114 A und B) S 497 - Streptocardin S 499 - Xantho-
thricin S 500 — Phagostatin S 501 — Luteomycin S 502 — Xantho-
Inhaltsverzeichnis XV
myeino S 503 — Antitoxoplasmatisches Antibioticum 534 S 505 —
Raisnomycin S 506 — Latumcidin S 507 — Amaromycin S 507 —
Virocidin S 508 - Rubromycin S 509 - Azomycin S 510 - Matamy-
ein S 511 - Desortomycin S 512 - Antibioticum PA-371 S 512 -
Nybomycin S 513 — Miramycin S 14
Antibiotica der Gruppe 4 B 514
Nigericin S 514 — Fla-vacid S 515 - Musarin S 516 — Endomycin
S 517 — Ramnacin S 518 - Mycospocidin S 519
Antibiotica der Gruppe 4 C 51!)
Microcin S 520 — Mycomycin S 520 - Antifungalcs Antibioticum C
S 521 — Antifungalcs Antibioticum D S 522 — Pleomycin S 523 —
Streptocin S 524 — Aklavin S 525 ,
Antibiotica gegen Viren, Rickettsien und Bakteriophagen 520
Noformicin S 526 — Phagomycin S 27 — Phagocidin S 527 — Coerulo-
myein S 528 — Ehrlichin S 529 — ( irdiein S 530 - Antivirales Anti
bioticum aus Nocardia S 531 — Phagolessin S 532 — Achromoviro- •
myein S 535 — Violarin S 535
Gegen Protozoen wirksame Antibiotica 53 ~
Anisomycin S, 535 — Borrelidin S 5- !6 — Antibioticum PA-128 S 537 —
Trypanocides Antibioticum S 537
Antibiotica mit krebshemmender Wirkung 53 S
Sarkomycin S 539 - Lenamycin S 512 - Toyocam ycin S 543 — Tuber-
cidin S 544 — Antibioticum 289 S 5 15 — Cellocidin S 546 — Raromycin
S 547 — Caryomycin S 547 — AUG MLis-Mycetin S 547
Verzeichnis der alphabetisch geordneten Actinomycel en-Artc-n 54S
Übersichtstabellen der Antibiotica aus Actinomyceten 557
Sachregister 1 641
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