大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养鉴定和体外分化特点
目的建立骨骼肌卫星细胞（SMSC）的体外分离、原代培养、鉴定方法，观察细胞的成肌分化特点。方法采用组织块法结合差速贴壁法获得SMSC。采用免疫荧光和流式细胞仪以Pax7为标志物鉴定分离获得的卫星细胞纯度，用分化培养基诱导SMSC的体外分化，实时定量PCR法检测分化标志基因成肌决定因子（MyoD）和生肌素的mRNA相对表达量。结果组织块法培养约1周，可见细胞从组织块边缘爬出。经差速贴壁法纯化后，流式细胞仪检测所获得的原代SMSC纯度可达97．6％。细胞体外诱导分化后，MyoD和生肌素基因呈时序性表达。结论组织块法可成功获得高纯度的SMSC，在体外具有良好的分化能力。...
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| Veröffentlicht in: | 中华医学杂志 2016, Vol.96 (12), p.971-974 |
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| 1. Verfasser: | |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | chi |
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Volltext |
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| creator | 冯永强 李峥 褚万立 郁永辉 马丽 柴家科 |
| description | 目的建立骨骼肌卫星细胞（SMSC）的体外分离、原代培养、鉴定方法，观察细胞的成肌分化特点。方法采用组织块法结合差速贴壁法获得SMSC。采用免疫荧光和流式细胞仪以Pax7为标志物鉴定分离获得的卫星细胞纯度，用分化培养基诱导SMSC的体外分化，实时定量PCR法检测分化标志基因成肌决定因子（MyoD）和生肌素的mRNA相对表达量。结果组织块法培养约1周，可见细胞从组织块边缘爬出。经差速贴壁法纯化后，流式细胞仪检测所获得的原代SMSC纯度可达97．6％。细胞体外诱导分化后，MyoD和生肌素基因呈时序性表达。结论组织块法可成功获得高纯度的SMSC，在体外具有良好的分化能力。 |
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