汉防己甲素干预K562细胞mdr1基因表达的研究

目的观察汉防己甲素（TTD）对阿霉素诱导的K562细胞mdr1基因表达的影响，并初步探讨其机制。方法采用MTT法观察TTD对K562细胞的毒性作用，以0．6 μg/ml阿霉素单独作用或0．6 μg/ml阿霉素联合不同浓度的TTD（0．5、1．0、2．0 μg/ml）作用于K562细胞，用RT—PCR法检测mdr1 mRNA、NF—κB mRNA水平，用流式细胞术检测P—gp的表达情况，用胞内罗丹明123（Rh0123）积聚试验检测P—gP的功能。结果空白对照K562细胞未见明显mdr1 mRNA及P-gP表达（水平分别为0．171±0．012、7．85±0．15），细胞内Rh0123平均荧光强度（反映P—gP功能）为711．9±63．6，NF—κB mRNA水平为0．783±0．090；0．6 μg／ml阿霉素作用24h后mdr1 mRNA、P—gP、NF—κB mRNA表达上调为0．428±0．012、73．68±1．84、1．075±0．047，细胞内Rh0123平均荧光强度下降为347．8±60．6（P值均〈0．05）；2．0 μg／ml TTD预作用24h再与0．6 μg／ml阿霉索联合作用24h能显著抑制阿霉素诱导的mdr1 mRNA、P—gP表达及功能、NF—κB mRNA的上调（分别为0．148±0．006、7．18±0．38、799．7±45．8、0．627±0．098）（P〈0．05），而0．5、1．0 μg／ml TTD无明显影响。结论TTD以浓度依赖性的方式干预阿霉素诱导的mdr1 mRNA、P—gP表达和P-gP功能的上调，其机制可能与TTD抑制了阿霉素诱导的NF—κB的表达有关。