单细胞PCR用于HLA配型的研究

单细胞PCR用于HLA配型的研究

R3; 目的 研究用筑巢式多重PCR技术对单细胞进行HLA配型,分析影响单细胞PCR扩增的因素.方法 首先分别采用不同的细胞裂解方法制备单细胞DNA模板,然后采用多重PCR分别扩增HLA-A,B基因的第2、3外显子和第2内含子区域,HLA-DRB1基因的第2外显子区域,最后根据大量DNA的常规HLA分型结果对单细胞第1轮扩增产物进行第2轮筑巢式序列特异性引物PCR(PCR-SSP)分型.结果 酶解法制备单细胞DNA模板效率最高,第1轮扩增成功率为93.3%,而碱裂法和冻融法分别为83.3%和73.3%;采用酶解法制备单细胞DNA模板进行第2轮PCR-SSP分型验证,20份标本扩增成功率为95%...

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Veröffentlicht in:中华血液学杂志 2007, Vol.28 (5), p.308-311
Hauptverfasser: 李栋, 张乐玲, 鞠秀丽, 侯怀水, 时庆, 沈柏均
Format: Artikel
Sprache:chi
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creator 李栋
张乐玲
鞠秀丽
侯怀水
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