卵巢上皮性癌细胞系OVCAR-3侧群细胞的生物学特性分析

卵巢上皮性癌细胞系OVCAR-3侧群细胞的生物学特性分析

目的检测和分选人卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞系OVCAR-3中的侧群（sP）细胞，鉴定其是否具有肿瘤干细胞的生物学特性。方法OVCAR-3细胞经DNA染料Hoechst33342染色后，采用流式细胞仪检测和分选低染（即sP细胞）和高染[即非侧群（NSP）细胞]的两群细胞。通过裸鼠体内的有限稀释成瘤试验对比sP和NSP细胞的成瘤能力[以成瘤比率（成瘤的裸鼠数／接种的裸鼠数）和成瘤时间表示]、自我更新和分化能力。实时PCR技术检测sP和NSP细胞中干性基因（Oct-4、Klf4、Nanog基因）和三磷酸腺苷结合盒（ABC）转运蛋白家族重要分子——ABCG2、ABCB1、ABCC2基因的表达。药敏试验...

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Veröffentlicht in:中华妇产科杂志 2012, Vol.47 (4), p.281-285
Hauptverfasser: 骆黎静, 赵喆, 曾建芳, 梁兵, 杨佳欣, 曹冬焱, 沈铿
Format: Artikel
Sprache:chi
Schlagworte:
ABC转运蛋白
Hoechst33342
Nanog基因
OVCAR-3细胞
侧群细胞
卵巢上皮性癌
卵巢癌细胞系
生物学特性
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creator 骆黎静
赵喆
曾建芳
梁兵
杨佳欣
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description 目的检测和分选人卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞系OVCAR-3中的侧群（sP）细胞，鉴定其是否具有肿瘤干细胞的生物学特性。方法OVCAR-3细胞经DNA染料Hoechst33342染色后，采用流式细胞仪检测和分选低染（即sP细胞）和高染[即非侧群（NSP）细胞]的两群细胞。通过裸鼠体内的有限稀释成瘤试验对比sP和NSP细胞的成瘤能力[以成瘤比率（成瘤的裸鼠数／接种的裸鼠数）和成瘤时间表示]、自我更新和分化能力。实时PCR技术检测sP和NSP细胞中干性基因（Oct-4、Klf4、Nanog基因）和三磷酸腺苷结合盒（ABC）转运蛋白家族重要分子——ABCG2、ABCB1、ABCC2基因的表达。药敏试验检测sP和NSP细胞对4种化疗药物（顺铂、紫杉醇、多柔比星、米托葸醌）的敏感性。结果OVCAR．3细胞系中可检测到少量的sP细胞，其比例为（1．13±0．39）％。10。个sP细胞即可在裸鼠体内成瘤，成瘤比率为2／5，成瘤时间为52～61d；而至少10。个NSP细胞才能成瘤，成瘤比率为2／5，成瘤时间为64～98d。SP细胞的成瘤性至少为NSP细胞的100倍。10个sP细胞接种裸鼠后所形成的瘤组织中sP细胞的比例为（2．094-0．73）％，与分选前的比例相似。sP细胞中干性基因Oct-4和Klf4及ABCG2和ABCC2基因的表达量分别是NSP细胞的（1．95±0．41）、（4．26±0．63）、（3．22±0．36）和（1．76±0．26）倍，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。在0．25μg／ml顺铂、0．01μmol／L紫杉醇、0．25μmol／L多柔比星和0．05μg／ml米托蒽醌分别作用下，sP和NSP细胞的相对活性分别为0．757±0．105、0．474±0．035，0．521±0．092、0．384±0．073，0．742±0．051、0．526±0．088，0．690±0．096、0．466±0．112；相同药物浓度下，sP细胞的相对活性显著高于NSP细胞（P均〈0．05）。结论卵巢癌细胞系OVCAR-3来源的sP细胞与NSP细胞相比，具有显著增强的体内成瘤能力、自我更新和分化能力、高表达干性基因和ABC转运蛋白家族基因以及多药耐药等肿瘤干细胞样细胞的生物学特性。sP表型可考虑作为分选卵巢癌干细胞样细胞的有效方法。
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