针对Her-2基因的小分子干扰RNA对卵巢上皮性癌细胞生物学行为影响的研究

目的 通过小分子干扰RNA（siRNA）对Her-2基因表达的影响,探讨其对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞生物学行为的影响.方法 针对Her-2基因的siRNA质粒和阴性对照质粒在脂质体介导下转染到包装病毒细胞株PT67中,嘌呤霉素筛选细胞克隆,收集其上清液并感染SKOV3细胞,经过嘌呤霉素筛选得到稳定转染的细胞株SKOV3/siRNA、SKOV3/siRNA-negative,并通过RT-PCR和免疫组化方法鉴定Her-2基因表达的抑制效果.用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖并绘制生长曲线,通过流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡,并将稳定转染的细胞株接种到裸鼠皮下检测成瘤情况.结果 （1）SKOV3/siRNA细胞Her-2基因的表达明显减弱.（2）SKOV3/siRNA细胞的G0/G1期细胞占68.6%,S期细胞占15.1%,SKOV3/siRNA-negative细胞的G0/G1期占55.8%,S期占23.3%.（3）SKOV3/siRNA细胞的早期凋亡率为（10.500±0.250）%,而SKOV3/siRNA-negative细胞为（0.340±0.010）%,两者比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.（4）与SKOV3/siRNA-negative细胞比较,SKOV3/siRNA细胞的生长速度减慢（P＜0.05）,接种于裸鼠皮下的肿瘤生长速度明显减慢（P＜0.01）.结论 siRNA可以有效抑制Her-2基因的表达,抑制卵巢癌细胞的生物学行为.