茶树CsWRKYIIcs转录因子的克隆及功能分析

茶树CsWRKYIIcs转录因子的克隆及功能分析

[目的]以'陕茶1号'为材料,克隆CsWRKYIIcs转录因子并分析序列特征,了解其在不同组织和非生物胁迫下的表达模式以及转录活性,为深入研究茶树在逆境胁迫中的功能提供理论依据.[方法]根据茶树基因组数据库注释的WRKY序列设计特异性引物,采用RT-PCR技术从'陕茶1号'中扩增CsWRKYIIcs的cDNA序列,用生物信息工具分析序列的特点,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究基因的表达模式,用酵母试验验证其转录活性.[结果]获得9条CsWRKYIIcs的cDNA序列,开放阅读框长度分别为561、960、936、978、897、912、720、10...

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Veröffentlicht in:中国农业科学 2020-06, Vol.53 (12), p.2460-2476
Hauptverfasser: 肖罗丹, 唐磊, 王伟东, 高岳芳, 黄伊凡, 孟阳, 杨亚军, 肖斌
Format: Artikel
Sprache:chi
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creator 肖罗丹
唐磊
王伟东
高岳芳
黄伊凡
孟阳
杨亚军
肖斌
description [目的]以'陕茶1号'为材料,克隆CsWRKYIIcs转录因子并分析序列特征,了解其在不同组织和非生物胁迫下的表达模式以及转录活性,为深入研究茶树在逆境胁迫中的功能提供理论依据.[方法]根据茶树基因组数据库注释的WRKY序列设计特异性引物,采用RT-PCR技术从'陕茶1号'中扩增CsWRKYIIcs的cDNA序列,用生物信息工具分析序列的特点,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究基因的表达模式,用酵母试验验证其转录活性.[结果]获得9条CsWRKYIIcs的cDNA序列,开放阅读框长度分别为561、960、936、978、897、912、720、1008和969 bp,分别编码186、319、311、325、298、303、239、335、322个氨基酸.除了CsWRKYIIc7缺少锌指序列外,其他CsWRKYIIcs均含有1个WRKY保守结构域和典型的C2H2型锌指结构.不同物种中的WRKYIIcs具有相似的保守基序,而茶树CsWRKYIIcs和拟南芥、葡萄等双子叶植物的WRKYIIcs氨基酸序列相似性更高.另外,CsWRKYIIcs启动子区域均预测到多个与非生物胁迫相关的顺式作用元件,意味着其可能参与非生物胁迫响应.qRT-PCR结果表明,9个CsWRKYIIcs在根和花中的表达量高于茎和叶,具有一定的特异性.同时,在干旱、ABA、高温和高盐胁迫下被不同程度的诱导表达,其中CsWRKYIIc1和CsWRKYIIc7的表达量变化显著,与推定的顺式作用元件结果相符.酵母试验表明9个茶树CsWRKYIIcs均具有转录激活活性.[结论]克隆获得9个茶树CsWRKYIIcs转录因子,它们参与了茶树对ABA、干旱、高温和高盐胁迫的响应,也可能发挥转录激活因子的调控作用.CsWRKYIIc1和CsWRKYIIc7可作为候选基因深入研究茶树的抗逆功能.
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