小鼠Nanog基因原核表达载体的构建及表达

S8; [目的]构建小鼠Nanog基因原核表达载体并进行表达,以期得到大量GST融合蛋白.[方法]根据GeneBank中的Nanog序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有Nanog基因片段的pNA992重组质粒为模板,经PCR扩增出918 bp的DNA片段.将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化TGⅠ大肠杆菌,筛选阳性克隆,其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-Nanog已构建成功.提取pGEX-KG-Nanog质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE电泳鉴定,并优化其表达条件.[结果]在大肠杆菌中获得Nano...

Ausführliche Beschreibung

Bibliographische Detailangaben

Veröffentlicht in:	中国农业科学 2007, Vol.40 (2), p.373-378
Hauptverfasser:	李军, 吕长荣, 窦琳, 窦忠英
Format:	Artikel
Sprache:	chi
Online-Zugang:	Volltext
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