antagomiR-21上调SIRT1激活PI3K/Akt/eNOS信号通路改善T2DM大鼠冠状动脉内皮依赖性舒张

R5%R363; [目的]探讨miR-21 抑制剂antagomiR-21 调控沉默信息调节因子1(SIRT1)对2 型糖尿病(T2DM)大鼠冠状动脉内皮依赖性舒张的影响及其机制.[方法]以腹腔注射链脲佐菌素加高脂饲料喂养的方法建立T2DM 大鼠模型,将28 只成模大鼠随机分为模型组、antagomiR-NC组、antagomiR-21 组、antagomiR-21+SIRT1 抑制剂EX527 组,每组7 只;另将7 只普通饲料喂养的正常大鼠作为对照组.观察大鼠冠状动脉血流变化,采用离体血管环灌流技术观察大鼠冠状动脉的舒张功能.将体外培养的人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)分为甘露醇组、高糖组、高糖+antagomiR-NC组、高糖+antagomiR-21 组、高糖+antagomiR-21+EX527 组,采用qRT-PCR检测miR-21、SIRT1 的mRNA表达,Western blot检测SIRT1、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及其磷酸化蛋白的表达.[结果]与对照组相比,T2DM模型大鼠冠状动脉中miR-21 水平升高96.88％,而SIRT1蛋白和mRNA 水平、冠状动脉流量分别降低40.85％、64.29％、22.15％(P＜0.05);与甘露醇组比较,体外高糖处理的HCAEC 中miR-21 表达升高285.71％,SIRT1 蛋白和mRNA表达水平分别降低44.78％、74.51％(P＜0.05);an-tagomiR-21 干预后体内外miR-21 水平分别降低77.42％、58.66％,SIRT1 蛋白水平分别升高55.56％、91.43％,SIRT1 mRNA 水平分别升高88.57％、97.30％(P＜0.05);与模型组相比,antagomiR-21 干预后大鼠冠状动脉流量升高19.23％,10-8 mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L及10-5mol/L 乙酰胆碱(Ach)诱导的大鼠冠状动脉舒张率分别升高111.89％、41.88％、41.98％、30.01％(P＜0.05),10-8 mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L 及10-5mol/L 去氧肾上腺素(Phe)诱导的大鼠冠状动脉收缩率分别降低36.71％、47.90％、49.19％、45.27％(P＜0.05);antagomiR-21 干预